hrvatski

Rast i metabolizam CCO stanica u kulturi - učinak glutamina

Kulture životinjskih stanica imaju široku primjenu u biotehnološkoj proizvodnji cjepiva, dijagnostičkih i terapijskih spojeva. Prinosi proizvoda dobiveni ovom tehnologijom obično su niski, a poboljšanja je moguće postići boljim oblikovanjem medija za uzgoj te boljom kontrolom samog procesa. Metabolizam transformiranih stanica u kulturi znatno se razlikuje od metabolizma ishodnih, roditeljskih stanica, a brzine razgradnje glukoze i glutamina obično su povećane u usporedbi s metabolizmom stanica u in vivo uvjetima. Cilj ovog rada je karakterizirati fiziološko ponašanje CCO stanica i utvrditi učinak glutamina na njihov rast. Usporedbom parametara rasta CCO stanica u preporučenom DME mediju za uzgoj (ATCC) i DME mediju za uzgoj (Sigma) postignuti su slični prinosi stanica i specifične brzine rasta. U daljnjim pokusima stoga je korišten DME medij za uzgoj (Sigma) kako bi mogli varirati koncentracije glutamina. U mediju za uzgoj s konstantnom koncentracijom glukoze (5, 56 mM) i različitim koncentracijama glutamina (0 mM ; 0, 5 mM ; 2 mM i 5 mM) najviša koncentracija stanica (11, 7x10e5 st/mL) postignuta je u mediju za uzgoj s 5 mM glutamina. Pri uzgoju CCO stanica u mediju za uzgoj s 0, 5 mM ; 2 mM ; 5 mM i 10 mM glutamina, a bez dodatka glukoze, najviša koncentracija stanica od 10, 5x10e5 st/mL postignuta je u mediju za uzgoj s 5 mM glutamina. Prinos CCO stanica u mediju za uzgoj s glutaminom, a bez dodatka glukoze se ne povećava s povećanjem koncentracije glutamina. Koncentracije glutamina u mediju za uzgoj iznad 5mM imaju blagi inhibitorni učinak na rast CCO stanica. Tijekom uzgoja CCO stanica u mediju za uzgoj s glutaminom, a bez dodatka glukoze stanice su rasle jednako dobro kao u mediju za uzgoj s dodanom glukozom i glutaminom. Na osnovu provedenih istraživanja može se zaključiti da glutamin predstavlja važan metabolički građevni element za CCO stanice. Njegov se nedostatak u mediju za uzgoj ne može kompenzirati prisustvom glukoze, ali se uloga glukoze kao izvora energije može kompenzirati prisustvom glutamina.

CCO stanice; glutamin; metabolizam; stanične linije riba

nije evidentirano