hrvatski

Učinak dietilstilbestrola na rast i morfologiju CHO-K1 stanične linije

Kultura životinjskih stanica nezaobilazan je dio biotehnologije i biofarmaceutike, te srodnih znanstvenih područja kao što su molekularna biologija i toksikologija. Alternativni in vitro testovi kao predtestovi ispitivanjima na pokusnim životinjama pogodni su za temeljna znanstvena istraživanja kojima je svrha utvrditi molekularne i stanične mehanizme toksičnog djelovanja ispitivane kemikalije. Posljednjih se nekoliko godina intenzivno provode istraživanja utjecaja endokrinih modulatora, kemijskih spojeva koji oponašaju prirodne hormone i ometaju njihovo djelovanje u organizmu te tako dovode i do patoloških promjena. Sintetski estrogeni, iz raznih farmaceutskih pripravaka, dospijevaju u okoliš i time predstavljaju problem za zdravlje ljudi i životinjskog svijeta. Dietilstilbestrol (DES) je sintetski estrogen, koji ima slično djelovanje i estrogene karakteristike kao prirodni hormon 17ß-estradiol. Cilj ovog rada je utvrditi učinak DES-a na rast i morfologiju CHO-K1 stanične linije. Stanice su tretirane DES-om u koncentracijama od 1, 5 i 10 µg/mL i utvrđen je citotoksičan učinak ovisan o koncentraciji i trajanju tretmana. Najjaču inhibiciju 72 h nakon tretmana, izazvala je koncentracija od 10 µg/mL DES-a i to gotovo za 95%. Ispitano je i djelovanje bazičnog fibroblastnog faktora rasta (bFGF) koji pozitivno utječe na rast CHO-K1 stanica. Unatoč pokazanom proliferativnom učinku, dodatak bFGF-a nije smanjio citotoksično djelovanje DES-a na CHO-K1 stanice. Uklanjanje medija s DES-om te dodatak svježeg medija potaknuo je revitalizaciju tretiranih stanica te su one postigle nivo rasta kao i kontrolne, netretirane stanice. Svjetlosnom mikroskopijom te bojanjem stanica kristal-ljubičastom bojom i hematoksilin-eozinom vidljive su promjene u nastalom monosloju te morfološke promjene kod stanica izloženih djelovanju 5 µg/mL DES-a. Također je primijećena pojava vakuolizacije citoplazme te kondenzacije jezgre što upućuje na početnu fazu procesa apoptoze.

apoptoza; CHO-K1 stanice; citotoksičnost; dietilstilbestrol

nije evidentirano