Validacija Endosafe PTS sustava i razvoj postupka testiranja kulture keratinocita i limbalnih stanica na endotoksine (CROSBI ID 414554)
Ocjenski rad | diplomski rad
Podaci o odgovornosti
Blažević, Valentina
Gaurina Srček, Višnja
Tominac Trcin, Mirna
hrvatski
Validacija Endosafe PTS sustava i razvoj postupka testiranja kulture keratinocita i limbalnih stanica na endotoksine
Stanična terapija keratinocitima i limbalnim stanicama pripada ATMP proizvodima koji se koriste za kliničku primjenu, stoga je potrebno osigurati visoku razinu sigurnosti i kvalitete. Endotoksini su komponente stanične stijenke gram-negativnih bakterija, kod pacijenta mogu izazvati septički šok i smrt. Proizvodi stanične terapije imaju potencijal za uvođenje endotoksina izravno u krv. Svrha ovog rada bila je razvoj postupka testiranja stanične kulture keratinocita i limbalnih stanica na prisutnost endotoksina putem komercijalnog Endosafe PTS sustava koji se temelji na LAL metodi. Prilikom provođenja testiranja na endotoksine razvijen je izračun putem kojeg je moguće definirati prihvatljive vrijednosti koncentracije endotoksina u proizvodu u skladu s smjernicama FDA, Europske farmakopeje 2.6.14. i ISO standardima. Endosafe PTS sustav uspješno je validiran za testiranje otpadnog medija kulture stanica na prisutnost endotoksina unutar kratkog vremenskog roka. Prilikom testiranja javile su se interferencije uzorka s LAL reagensom koje su uspješno prevladane razrjeđivanjem uzorka do MVD vrijednosti koja je određena za svakog pojedinog pacijenta. Nadalje, endotoksini snažno adheriraju na staklenu površinu, te uklanjanje endotoksina predstavlja kritičnu točku prilikom pohrane GM medija. GM medij testiran je na endotoksine tijekom 24 h i 11 dana, u staklenim bocama nije zabilježeno povećanje koncentracije endotoksina.
endotoksini, limbalne stanice, keratinociti, Endosafe PTS, validacija
nije evidentirano
engleski
Validation of Endosafe PTS system and practical approach for endotoxin testing of keratinocytes and limbal stem cells
nije evidentirano
endotoxins, limbal cells, keratinocytes, Endosafe PTS, validation
nije evidentirano
Podaci o izdanju
68
25.07.2017.
obranjeno
Podaci o ustanovi koja je dodijelila akademski stupanj
Prehrambeno-biotehnološki fakultet
Zagreb