hrvatski

Poglavlje: Određivanje primarne strukture DNA (sekvenciranje) (Metodološki tečajevi u biologiji i medicini (DNA i RNA))

Metoda sekvenciranja molekule DNA zasniva se na zaustavljanju enzimatske sinteze lanca DNA ugradnjom dideosiribonukleozid-trifosfata pa se ova metoda, osim Sangerovom, naziva još i enzimatskom dideoksi- metodom. Prirodni supstrati za sintezu DNA su deoksiribonukleozid-trifosfati (dNTP) dATP, dCTP, dGTP i dTTP. Sinteza DNA ide u 5’ → 3’ smjeru, a preduvjet za sintezu je postojanje početnice koja pronalazi sebi homologan slijed i čijim produžavanjem nastaje novi DNA lanac. DNA polimeraze, enzimi koji sintetiziraju DNA, mogu ugraditi u rastući lanac i analoge dNTP-ova, dideoksiribonukleozid-trifosfate (ddNTP) koji nemaju hidroksilnu skupinu na 3’ -položaju deoksiriboze, pa nakon njihove ugradnje, zbog nemogućnosti uspostavljanja nove fosfodiesterske veze, dolazi do zaustavljanja daljnje sinteze DNA.

dideoksi-sekvenciranje; deoskinukleotidi; dideoksinukleotidi

nije evidentirano