hrvatski

Utjecaj cigaretnog dima, izvanstaničnog proteina toplinskog šoka 70, lipopolisaharida i lipoteikoične kiseline na koncentraciju izvanstaničnog adenozin-trifosfata u THP-1 staničnoj liniji

Adenozin-trifosfat (ATP) smatra se molekularnim obrascem oštećenja kada prelazi iz staničnog u izvanstanični prostor pri nekroznom umiranju stanice uzrokovanom patogenima ili drugim oblicima staničnog stresa [1]. Kronična opstrukcijska plućna bolest (KOPB) upalni je sindrom u kojem dolazi do uništavanja plućnog tkiva zbog proizvodnje citokina i kemokina u kaskadnim upalnim reakcijama izazvanim dimom cigareta, iritirajućim česticama i plinovima [2]. Cilj istraživanja bio je ispitati utjecaj izvanstaničnog proteina toplinskog šoka 70 (eHsp70), dima cigareta, bakterijskih komponenti – lipopolisaharida (LPS) i lipoteikoične kiseline (LTA) na koncentraciju izvanstaničnog ATP-a (eATP) u monocitno-makrofagnoj staničnoj liniji THP-1. Koncentracija eATP-a određena je luminometrijskom metodom uz upotrebu komercijalno dostupnog test-paketa u mediju iznad THP-1 stanica, korištenih kao stanični model sistemskog oblika KOPB-a, nakon tretiranja s rekombinantnim humanim (rh) Hsp70 u koncentracijama 0, 3, 1 i 3 μg/mL, 2, 5-%-tnim i 5-%-tnim ekstraktom dima cigareta (CSE), 0, 1 μg/mL LPS-om i 1 μg/mL LTA tijekom 1, 4 i 24 sata. rhHsp70 u koncentracijama 1 i 3 μg/mL značajno je povećao koncentraciju eATP-a nakon 4 i 24 sata. Isti efekt vidljiv je i nakon individualnog tretiranja LPS-om i LTA te u kombinacijama sa svim koncentracijama rhHsp70 nakon 4 i 24 sata. Kombinacije LPS-a i LTA s rhHsp70 pokazale su značajno manju promjenu u koncentraciji eATP-a u odnosu na zasebne tretmane LPS-om i LTA. 2, 5-%-tni CSE nakon 4 sata povećao je koncentraciju eATP-a u mediju iznad THP-1 stanica, kako u individualnom tretmanu, tako i u kombinaciji sa svim koncentracijama rhHsp70. Značajnije povećanje koncentracije eATP-a u tretmanu s obje koncentracije CSE-a u individualnim i kombiniranim tretmanima s rhHsp70 postignute su nakon 24 sata. Rezultati nakon prve vremenske točke u trajanju od 1 sata nisu pokazali značajne razlike niti za jedno provedeno tretiranje. CSE, Hsp70, LPS i LTA utječu na upalne odgovore u THP-1 staničnoj liniji što rezultira smanjenim preživljenjem stanica, odnosno povećanjem koncentracije eATP-a.

cigaretni dim, izvanstanični ATP, izvanstanični Hsp70, THP-1 stanična linija

nije evidentirano