hrvatski

Djelovanje izvanstaničnog Hsp70 i ekstrakta dima cigareta na aktivaciju protein-kinaza aktiviranih mitogenima te na ekspresiju receptora 2 sličnog Tollu i unutarstaničnog Hsp70

Dim cigareta smatra se jednim od glavnih čimbenika u razvoju kronične opstrukcijske plućne bolesti (KOPB). Upalnom odgovoru pridonosi izvanstanični protein toplinskog šoka 70 (Hsp70) aktivacijom receptora 2 sličnog Tollu (TLR2), što dovodi do kaskadne aktivacije protein-kinaza aktiviranih mitogenom (MAPK) poput protein-kinaza reguliranih izvanstaničnim signalima (ERK) i p38. Suprotno tome, unutarstanični Hsp70 potiskuje upalni odgovor. Cilj ovog rada bio je ispitati utjecaj različitih koncentracija ekstrakta dima cigareta (CSE), izvanstaničnog Hsp70, lipopolisaharida (LPS) i lipoteikoične kiseline (LTA), te njihovih kombinacija, na ekspresiju receptora TLR2 i unutarstaničnog Hsp70 te na aktivaciju MAPK u 16HBE stanicama humanog bronhijalnog epitela. Aktivacija i ekspresija MAPK (ERK i p38) te ekspresija unutarstaničnog Hsp 70 nakon 30 minuta, 2 i 8 sati tretiranja određena je Western blot tehnikom, dok je ekspresija TLR2 nakon 24 sata tretiranja određena kvantitativnom lančanom reakcijom polimeraze u stvarnom vremenu (qPCR). Rezultati pokazuju da ne postoji značajna promjena u ekspresiji unutarstaničnog Hsp70 nakon 30 minuta u odnosu na netretirane kontrolne stanice, ali postoji porast nakon 2 i 8 sati. ERK pokazuje aktivaciju nakon 30 minuta kod gotovo svih tretiranja, ali nakon 2 sata niti jedno tretiranje ne povećava njenu aktivaciju. Međutim, nakon 8 sati izlaganja nižoj koncentraciji CSE-a te LPS-u i LTA, aktivacija ERK se povećava. CSE je u svim ispitivanim vremenskim periodima i koncentracijama doveo do povećane aktivacije p38. Do povećane aktivnosti p38 došlo je i nakon 30-minutnog izlaganja stanica LPS-u i LTA. Ekspresiju TLR2 povećavaju samo kombinacije izvanstaničnog Hsp70 s LPS-om ili LTA, dok CSE povećava ekspresiju TLR2 u individualnim i u kombiniranim tretiranjima. Možemo zaključiti da LPS i LTA aktiviraju MAPK nakon 30 min izlaganja na taj način uzrokujući akutnu upalu. S druge strane, CSE kontinuirano pridonosi aktivaciji MAPK te zbog toga vjerojatno više pridonosi razvoju kronične upale. Različitu ekspresiju Hsp70 možemo povezati s njegovom protu-upalnom ulogom, dok se njegovi učinci odvijaju putem TLR2 receptora.

Hsp70, dim cigareta, MAPK, TLR2, 16HBE stanice

nije evidentirano