hrvatski

Određivanje ključne(ih) miRNA u svrhu reguliranja lijekom potaknute epitelno-mezenhimalne tranzicije

Kasna pojava simptoma i nedostatak učinkovitih dijagnostičkih metoda učinili su rak jajnika najsmrtonosnijim od svih ginekoloških karcinoma. Poodmakli stadij bolesti i razvoj otpornosti na terapiju glavni su razlog neuspješnosti terapije, koja najčešće uključuje lijekove s platinom i taksane. Otpornost tumora na terapiju sve se češće povezuje s epitelno-mezenhimalnom tranzicijom (EMT), procesom uključenim u metastaziranje tumora. MikroRNA (miRNA) su male ne-kodirajuće RNA koje reguliraju ekspresiju gena na post-transkripcijskoj razini. E-kadherin i drugi regulatori EMT glavni su ciljevi miRNA. Osim članova obitelji miRNA-200, ulogu u EMT imaju i druge miRNA, kao što su miR-10, miR-155, miR-7, miR-221/222. U našem laboratoriju upotrebljavaju se tri linije stanica raka jajnika otporne na karboplatinu (OVCAR-3 CBP, MES-OV CBP, SK-OV-3 CBP), s fenotipom sličnom onome stanica mezenhimalnog podrijetla. OVCAR-3 CBP i MES-OV CBP su križno otporne na paklitaksel i pokazuju smanjenu ekspresiju članova obitelji miRNA-200. S ciljem određivanja potencijalnih miRNA od važnosti, uključenih u procese otpornosti na CBP i EMT, odabrana je roditeljska MES-OV i otporna MES-OV CBP linija stanica. Profiliranje miRNA rezultiralo je identifikacijom 379 miRNA različito eksprimiranih u MES-OV CBP stanicama u odnosu na MES-OV liniju stanica. Analizom dobivenih podataka te proučavanjem literature, kao potencijalno najznačajnije izdvojeno je devet miRNA kandidata, šest s povećanom te tri sa smanjenom ekspresijom. Njihova ekspresija u sva tri para staničnih linija provjerena je korištenjem metode RT-qPCR. Od izdvojenih, miR- 1269a i miR-665 pokazale su jednak uzorak povećane ekspresije u sve tri linije stanica te je postavljena hipoteza da bi upravo one mogle imati ulogu u oba procesa od interesa. Njihova moguća uključenost u karboplatinom potaknutoj EMT bit će ispitana transfekcijom roditeljskih OVCAR- 3 stanica s mimic-RNA sekvencama.

rak jajnika ; epitelno-mezenhimalna tranzicija ; karboplatina ; profiliranje miRNA ; Microarray

nije evidentirano