hrvatski

Ispitivanje mehanizma toksičnosti humanog amilina na RINm5F stanicama

Amilin je peptid od 37 aminokiselina koji se primarno sintetizira u i otpušta iz beta-stanica gušterače, gdje je pohranjen u istim sekretornim granulama kao i inzulin. Amilin je izoliran iz amiloida gušterače koji je opažen kod >90% pacijenata s tipom 2 šećerne bolesti, te se pokazalo da povećanim nakupljanjem amilina dolazi do učestalijeg umiranja beta-stanica gušterače. U našem smo istraživanju htjeli ispitati ulogu proteinskih kinaza aktiviranih mitogenima (MAPK) i kaspaza u umiranju beta-stanica koje potiče humani amilin. Ispitivanja smo vršili na RINm5F stanicama inzulinoma štakora, koje predstavljaju dobar model za proučavanje beta-stanica otočića gušterače. Nanomolarne koncentracije humanog amilina potiču umiranje RINm5F stanica, ovisno o vremenu izloženosti stanica amilinu i o primijenjenoj koncentraciji amilina. Ispitivanjem morfoloških promjena integriteta stanične membrane i kromatina pokazali smo da stanice prvenstveno umiru procesom apoptoze. Smrti stanica su prethodile snažna i dugotrajna aktivacija stresnih kinaza, kinaza koje fosforiliraju N-kraj transkripcijskog faktora c-Jun (JNK) i p38 MAP kinaza, te aktivacija kaspaze-3, koje je inducirao amilin. Inhibicija aktivacije JNK (imunosupresivnim lijekom FK506) ili p38 MAPK (specifičnim inhibitorom SB 203580) značajno je potisnula aktivaciju kaspaze-3 i potaknula je preživljavanje stanica. Istovremenom primjenom FK506 i SB 203580, ili samo primjenom inhibitora kaspaze-3, Ac-DEVD-CHO, gotovo je u potpunosti potisnuto kidanje prokaspaze-3 i umiranje stanica. Naši rezultati ukazuju da amilin stimulira snažnu i dugotrajnu aktivaciju JNK i p38 MAPK koje aktiviraju kaspazu-3, te na taj način inducira apoptozu RINm5F stanica.

amilin; apoptoza

nije evidentirano