hrvatski

Utjecaj endotelina-1 i PDGF-BB na proliferaciju ljudskih glatkomišićnih stanica iz plućne arterije

Plućna hipertenzija je bolest karakterizirana gubitkom kontrolnih mehanizama koji reguliraju plućni vaskularni tonus i preoblikovanje ljudskih glatkomišićnih stanica iz plućne arterije (hPASMC). Endotelin- 1 je impliciran u patogenezi plućne hipertenzije kao moćan vazokonstriktor i komitogen/ proliferacijski faktor. Cilj rada je utvrditi utjecaj endotelina- 1 na fosforilaciju ERK 1/2 i proliferaciju hPASMC. Dokazani mitogen, PDGF, je korišten kao pozitivna kontrola. Za inhibiciju učinaka endotelina- 1 i PDGF korišten je inhibitor endotelinskih A receptora odnosno inhibitor PDGF receptora. Imunokemijskim bojanjem je dokazan identitet glatkomišićnih stanica (korištenjem specifičnih protutijela na α- aktin i teški lanac miozina). Metodom Western blot utvrđena je vremenska ovisnost i ovisnost o dozi endotelina- 1 i PDGF pri fosforilaciji ERK 1/2. Eksperimenti unosa timidina i brojanja stanica su provedeni za istraživanje utjecaja endotelina- 1 i PDGF na proliferaciju. Dokazano je da PDGF uzrokuje proliferaciju ovisnu o dozi, dok endotelin- 1 nema utjecaja. Utvrđeno je da 10 μM koncentracija inhibitora PDGFR djeluje značajno citotoksično . Zatim je dokazano da isti inhibitor reducira PDGF- induciranu proliferaciju, dok inhibitor endotelinskih A receptora nije pokazao utjecaj na smanjenje PDGF- inducirane proliferacije. Budući da inhibitori nisu imali utjecaja na smanjenje fosforilacije ERK 1/2 induciranu odgovarajućim aktivatorima fosforilacije, PDGF i endotelinom- 1, zaključeno je da vjerojatno očituju svoj utjecaj djelovanjem na druge signalne puteve.

Endotelin- 1; PDGF- BB; proliferacija; fosforilacija ERK 1/2; ljudske glatkomišićne stanice iz plućne arterije

nije evidentirano