Nalazite se na CroRIS probnoj okolini. Ovdje evidentirani podaci neće biti pohranjeni u Informacijskom sustavu znanosti RH. Ako je ovo greška, CroRIS produkcijskoj okolini moguće je pristupi putem poveznice www.croris.hr
izvor podataka: crosbi !

Biološki učinak metil-transferaze RmtB u stanicama bakterije Escherichia coli DH5alpha (CROSBI ID 372170)

Ocjenski rad | diplomski rad

Mihalic, Vladimir Biološki učinak metil-transferaze RmtB u stanicama bakterije Escherichia coli DH5alpha / Maravić Vlahoviček, Gordana (mentor); Zagreb, Farmaceutsko-biokemijski fakultet, . 2012

Podaci o odgovornosti

Mihalic, Vladimir

Maravić Vlahoviček, Gordana

hrvatski

Biološki učinak metil-transferaze RmtB u stanicama bakterije Escherichia coli DH5alpha

Mehanizam otpornosti na antibiotike modifikacijom ciljnog mjesta djelovanja posredovan 16S rRNA metil-transferazama iz porodica Arm i Kam uobičajen je kod sojeva bakterija koji su prirodni proizvodači antibiotika, a pronađen je i kod patogenih sojeva otpornih na aminoglikozidne antibiotike. Metil-transferaze porodice Arm metiliraju evolucijski visoko očuvano mjesto A ribosomske podjedinice 30S na nukleotidu G1405 te time „zaklanjaju“ vezno mjesto za aminoglikozidne antibiotike čineći bakteriju otpornom na njih. Cilj ovog rada je ispitati biološki učinak metil-transferaze RmtB u stanicama E. coli DH54. Usporedbom generacijskih vremena stanica E. coli DH5alpha sa i bez rekombinantnog plazmida koji sadrži gen za metil-transferazu RmtB te provedbom testa konkurencije rasta stanica ispitano je usporava li prisutnost metil-transferaze RmtB rast stanica E. coli DH5alpha te opterećuje li enzim stanice kad se uzgajaju u zajedničkoj kulturi s istim stanicama bez metil-transferaze tijekom više ciklusa rasta. Kako bi se istražili mogući mehanizmi uzroka sporijeg rasta stanica s metil-transferazom RmtB proveden je beta-galaktozidazni test. Njime je ispitan utjecaj metil-transferaze RmtB na točnost dekodiranja tijekom translacije mRNA na ribosomu. Rezultati pokazuju da stanice E. coli DH5alpha koje eksprimiraju metil-transferazu RmtB rastu sporije od stanica koje ju ne eksprimiraju što upućuje da prisutnost metil-transferaze usporava rast bakterijske stanice. Također, u uvjetima nadmetanja za hranjive tvari i životni prostor stanice E. coli DH5alpha s metil-transferazom RmtB ne mogu konkurirati stanicama bez ovog enzima. Provedbom beta-galaktozidaznog testa pokazalo se da prisutnost metiltransferaze RmtB metilacijom ciljnog nukleotida u 16S rRNA uzrokuje učestalije pogreške prilikom dekodiranja na A i P-mjestu ribosoma tijekom elongacije što može biti uzrok uocenog usporenja rasta stanica. Dobiveni rezultati daju podlogu za daljnja istraživanja o metil-transferazama iz porodice Arm kao faktoru otpornosti na aminoglikozidne antibiotike te njihovom utjecaju na biokemijske procese kljucne za život bakterijske stanice čime se otvaraju mogućnosti razvoja novih tipova lijekova važnih u suzbijanju bakterijske otpornosti na aminoglikozidne antibiotike.

metil-transferaza RmtB; otpornost na aminoglikozide; test konkurencije rasta; generacijsko vrijeme; tocnost dekodiranja

nije evidentirano

engleski

Biological effect of methyltransferase RmtB in Escherichia coli DH5alpha

nije evidentirano

methyltransferase RmtB; aminoglycoside resistance; growth competition assay; generation time; decoding fidelity

nije evidentirano

Podaci o izdanju

63

03.05.2012.

obranjeno

Podaci o ustanovi koja je dodijelila akademski stupanj

Farmaceutsko-biokemijski fakultet

Zagreb

Povezanost rada

Farmacija, Biologija