Nalazite se na CroRIS probnoj okolini. Ovdje evidentirani podaci neće biti pohranjeni u Informacijskom sustavu znanosti RH. Ako je ovo greška, CroRIS produkcijskoj okolini moguće je pristupi putem poveznice www.croris.hr
izvor podataka: crosbi !

Određivanje N-glikanskog profila sa suhih krvnih mrlja (CROSBI ID 389758)

Ocjenski rad | diplomski rad

Keser, Toma Određivanje N-glikanskog profila sa suhih krvnih mrlja / Lauc, Gordan (mentor); Zagreb, Farmaceutsko-biokemijski fakultet, . 2011

Podaci o odgovornosti

Keser, Toma

Lauc, Gordan

hrvatski

Određivanje N-glikanskog profila sa suhih krvnih mrlja

S obzirom na to da bi razvoj dijagnostičkih metoda za analizu glikana pružio zanimljive mogućnosti za dijagnostiku, prognostiku i praćenje bolesti, tehnologija DBS-a mogla bi značajno pridonijeti pojednostavljenju i pojeftinjenju njihovog razvoja i istraživanja te njihove potencijalne rutinske primjene. U ovome radu ispitano je može li se sa suhih krvnih mrlja dobiti N-glikanski profil koji je direktno usporediv s profilom N-vezanih glikana dobivenih iz plazme, te može li se dobiti jednako dobar profil glikana s krvnih kartica starih 2 godine. U tu su svrhu suhe krvne mrlje isprane s jednim od tri različita otapala (puferom za lizu, PBS-om ili vodom) te su se glikani oslobođeni N-glikozidazom F obilježili s flourescentnim markerom i zatim analizirali tekućinskom kromatografijom visoke djelotvornosti koja se temelji na hidrofilnim interakcijama (HILIC). Također je proveden dodatni eksperiment za ispitivanje ponovljivosti metode. Rezultati su pokazali da se N-glikanski profil može dobiti sa suhih krvnih mrlja pomoću sva tri otapala koja su korištena za njihovo ispiranje, ali postoje razlike u razlučivosti. Pufer za lizu eritrocita se pokazao kao najbolji izbor od triju korištenih otapala u svrhu dobivanja N-glikanskog profila. Profil dobiven tim puferom ima najveći intenzitet i razlučivost koja najviše sliči N- glikanskom profilu plazme. Glikanski profili dobiveni ispiranjem suhih krvnih mrlja s PBS-om i vodom više sliče profilu dobivenom iz pune krvi. Iz ponovljenog eksperimenta zaključeno je da acetonitril ne pomaže u ispiranju glikoproteina s celuloznog papira te da se iz krvnih mrlja pohranjenih na običnom kromatografskom filter papiru može dobiti jednako dobar glikanski profil kao s non-FTA krvnih kartica. Metoda pokazuje prihvatljivu ponovljivost za kompleksne biološke uzorke, ali postoji još prostora za optimiranje metode. No, kada se metoda u potpunosti optimira, prednosti uzorkovanja DBS tehnologijom biti će mnogobrojne.

glikozilacija; N-glikanski profil; suhe krvne mrlje; HPLC

nije evidentirano

engleski

Determination of N-glycan profile from dried blood spots

nije evidentirano

glycosylation; N-glycan profile; dried blood spots; HPLC

nije evidentirano

Podaci o izdanju

39

01.07.2011.

obranjeno

Podaci o ustanovi koja je dodijelila akademski stupanj

Farmaceutsko-biokemijski fakultet

Zagreb

Povezanost rada

Farmacija