hrvatski

Utjecaj agonista TLR receptora na vijabilnost NCI-H292 epitelnih stanica

Receptori slični Toll receptoru Drosophila vrste (TLR, eng. Toll-like receptors) prepoznaju različite mikoorganizme i endogene molekule otpuštene iz ozlijeđenog tkiva. Uključeni su u regulaciju urođenog i stečenog imuniteta, te imaju važnu ulogu u održavanju homeostaze u plućima. Pretjerana aktivacija receptora inhaliranim česticama u kombinaciji s genetskom predispozicijom može uzrokovati neprimjereno pojačanu upalu što dovodi do oštećenja tkiva. Nasuprot tome, smanjeno djelovanje TLR receptora značajno doprinosi povećanoj osjetljivosti na bakterije i viruse zbog smanjene sposobnosti fagocitiranja bakterijskih i apoptotoznih stanica. Na taj način TLR receptori sudjeluju u patogenezi kronične opstrukcijske plućne bolesti (KOPB) doprinoseći kroničnoj upali, razaranju plućnog tkiva te egzacerbacijama KOPB-a. U ovom istraživanju ispitivala se toksičnost različitih koncentracija agonista TLR receptora lipopolisaharida (LPS) i lipoteikoične kiseline (LTA) na NCI-H292 epitelnim stanicama traheo-bronhijalnog trakta. Na taj se način pokušao oponašati upalni odgovor u bolesnika s KOPB-om. Nakon 24 h kultivacije stanice su tretirane LPS-om i LTA u koncentracijama 0, 1 µg/mL, 0, 5 µg/mL, 1 µg/mL i 5 µg/mL tijekom 24h. Vijabilnost stanica određivala se mjerenjem katalitičke aktivnosti laktat dehidrogenaze (LDH) i spektrofotometrijskim određivanjem obojenog formazanskog produkta nakon dodatka 3-(4, 5-dimetiltiazol-2-il)-5-(3-karboksimetoksifenil)-2-(4-sulfofenil)-2H-tetrazolijeve soli (MTS). Dobiveni rezultati su pokazali da 0, 5 µg/mL LPS-a te 0, 5 i 1 µg/mL LTA uzrokuju gubitak integriteta stanične membrane budući da je izmjerena povišena aktivnosti LDH u mediju iznad tretiranih stanica u odnosu na ukupan LDH u NCI-H292 stanicama. Međutim, MTS test je pokazao da te iste koncentracije ne dovode do značajne promjene redukcijske sposobnosti stanica u odnosu na kontrolu. Također, istraživanje je pokazalo da niska koncentracija LPS-a, 0, 1 µg/mL, blago potiče proliferaciju NCI-H292 stanica u odnosu na kontrolu. Iz dobivenih rezultata zaključujemo da LPS i LTA u primijenjenim koncentracijama nisu značajno toksični za NCI-H292 stanice.

lipopolisaharid; lipoteikoična kiselina; TLR receptori; NCI-H292 stanice; kronična opstrukcijska plućna bolest

nije evidentirano