hrvatski

Utjecaj žučnih soli na permeabilnost liposoma i mehanizam oslobađanja kalceina

Cilj ovog rada bio je ispitati utjecaj žučnih soli na permeabilnost fosfolipidnog dvosloja liposoma i oslobađanje uklopljene hidrofilne tvari. Liposomi s kalceinom (hidrofilni fluorescentni marker) pripremljeni su metodom hidratacije suhog fosfolipidnog sloja korištenjem fosfatidilkolina kao jedine lipidne komponente. Homogenizacija liposomskih disperzija provedena je ekstruzijom kroz polikarbonatne membrane veličine pora 400 nm i 100 nm. Odjeljivanje neuklopljenog kalceina provedeno je gel kromatografijom, a konačna koncentracija fosfolipida u ekstrudiranoj liposomskoj disperziji je određena Bartlett-ovom metodom. Ispitivanja utjecaja žučnih soli na mehanizam oslobađanja uklopljenog sadržaja iz liposoma provedena su tako da su liposomi s uklopljenim kalceinom inkubirani kroz dulji vremenski period u otopinama natrijevog kolata, deoksikolata ili taurokolata različitih koncentracija. U određenim vremenskim intervalima svakom je uzorku izmjereno vrijeme života slobodnog i uklopljenog kalceina korištenjem metode vremenski koreliranog pojedinačnog brojanja fotona (eng. time-correlated single photon counting, TCSPC). Dobiveni podatci su matematički obrađeni te je izračunata količina oslobođenog kalceina. Sve ispitivane žučne soli imale su utjecaj na integritet liposomske mebrane što se očitovalo povećanjem permeabilnosti uklopljenog sadržaja iz liposoma (kalcein). Sve korištene otopine žučnih soli uzrokovale su postepeno otpuštanje kalceina iz liposoma (eng. graded leakage), pri čemu je za natrijev kolat i taurokolat potvrđeno da uzrokuju podvrstu heterogenog postepenog oslobađanja (heterogenous graded leakage) dok za natrijev deoksikolat to nije bilo moguće sa sigurnoću odrediti. Natrijev deoksikolat je imao najjači učinak na povećanje permeabilnosti fosfolipidnog dvosloja liposoma već u koncentraciji od 0, 5 mM. Kod svih ispitivanih otopina žučnih soli dokazano je da porastom koncentracije žučne soli i duljim vremenom inkubacije raste udio oslobođenog kalceina.

Liposomi ; Kalcein ; Žučne soli ;

nije evidentirano