hrvatski

Određivanje citokina izlučenih iz THP-1 i NCI-H292 stanica nakon tretiranja izvanstaničnim Hsp70

Kronična opstrukcijska plućna bolest (KOPB) karakterizirana je pojačanom kroničnom upalom dišnih putova i pluća koja dovodi do opstrukcije te sistemskom upalom [1]. Brojne upalne stanice i njihovi medijatori uključeni su u upalne procese KOPB-a, a važnu ulogu imaju receptori slični Toll receptoru Drosophila vrste TLR2 i TLR4 (eng. Toll like receptor). Izvanstanični protein toplinskog šoka Hsp70 (eng. heat shock protein 70) izmjeren je u povišenim koncentracijama u serumu bolesnika s KOPB-om, a smatra se da djeluje preko TLR2 i TLR4 receptora te na taj način izaziva sterilnu upalu [2, 3]. Cilj ovog istraživanja bio je ispitati ulogu izvanstaničnog Hsp70 proteina u imunosnom upalnom odgovoru na staničnim modelima KOPB-a određivanjem koncentracije upalnih citokina IL-1α (eng. interleukin 1α), IL-1β, IL-6, IL-8 i TNF-α (eng. tumor necrosis factor α). Kao plućni model KOPB-a korištena je stanična linija humanih bronhijalnih epitelnih stanica NCI-H292, a kao sistemski model KOPB-a stanična linija humanih monocitnih stanica THP-1. THP-1 i NCI-H292 stanice su tijekom 24 sata tretirane različitim koncentracijama rekombinantnog humanog Hsp70 proteina (rhHsp70) te agonistima TLR4 i TLR2 receptora: lipopolisaharidom (LPS) i lipoteikoičnom kiselinom (LTA). Koncentracija upalnih citokina izlučenih u stanični medij određena je sendvič ELISA-om (eng. enzyme-linked immunosorbent assay). Istraživanje je pokazalo da kod NCI-H292 stanica 0, 3, 1 i 3 µg/mL rhHsp70 stimulira izlučivanje IL-1α i IL-8, dok 0, 1, 0, 3, 1, 3 i 30 µg/mL rhHsp70 potiče otpuštanje IL-6. Nadalje, pokazano je kako tretiranje NCI-H292 stanica s LPS-om uzrokuje povećano izlučivanje IL-6 i IL-8, te da LPS uzrokuje snažnije izlučivanje IL-6 i IL-8 u odnosu na LTA. S druge strane, kod THP-1 stanica 10 i 30 µg/mL rhHsp70 uzrokuje povećanu koncentraciju IL-1β i IL-8, ali ne i IL-1α, IL-6 niti TNF-α. Također, dobiveni rezultati pokazuju da THP-1 stanice tretirane s LPS-om ili LTA izlučuju povećanu količinu svih ispitivanih citokina. Pri tome je uočeno kako LPS ima izraženiji učinak od LTA i na THP-1 stanice. Zaključujemo da izvanstanični Hsp70 protein potiče izlučivanje upalnih citokina te je moguće da doprinosi nastanku i/ili daljnjem pogoršanju lokalne i sistemske upale u bolesnika s KOPB-om.

KOPB, Hsp70, THP-1, NCI-H292, citokini

nije evidentirano