hrvatski

Kvantitativna analiza mikrokimerizma u perifernoj krvi oboljelih od sistemske skleroze

UVOD: SSc je kronična autoimuna bolest vezivnog tkiva nepoznate etiologije. Mikrokimerizam je prisutnost male količine stranih stanica ili DNA unutar tkiva ili cirkulacije pojedinca. Postoje dvije osnovne vrste mikrokimerizma, majčinski mikrokimerizam (MMc) i fetalni mikrokimerizam (FMc), koji se razvijaju kao posljedica dvosmjernog prometa stanica u trudnoći. CILJ ISTRAŽIVANJA: istražiti kvantitativne udjele Y-specifičnih genskih regija u uzorcima DNA izoliranih iz perifernih leukocita oboljelih od SSc-a i zdravih ispitanika te usporediti izmjerene koncentracije Y-DNA s biokemijskim i demografskim obilježjima ispitanika. MATERIJALI I METODE: U istraživanje je obuhvaćeno 18 oboljelih i 10 zdravih, punoljetnih ispitanica koje su rodile barem jedno muško dijete te dvije pozitivne kontrole muškog spola. Za izolaciju ukupnih perifernih leukocita (PBMC) iz pune krvi korišten je medij LymphoprepTM. Izolacija DNA provedena je primjenom komercijalnog kompleta Qiagen QIAamp Mini. Mjerenje koncentracije Y-DNA provedeno metodom qPCR na uređaju QuantStudio 5 primjenom komercijalnog kompleta QuantifilerTM Y Human Male DNA Quantification. Analiza biljega STR učinjena je na uređaju ABI Prism 310 Genetic Analyzer. REZULTATI: Prisutnost i koncentracija Y-DNA u uzorcima zdravih ispitanika i oboljelih od SSc-a nije zabilježena. Koncentracija Y-DNA uspješno je analizirana u standardnim uzorcima i u dvije pozitivne kontrole te su dobiveni profili Y STR kontrolnih ispitanika muškog spola. ZAKLJUČAK: Izostanak pozitivnog nalaza Y-DNA u uzorcima stanica PBMC oboljelih od SSc- a moguća je posljedica izrazito male količine Y-DNA u ispitivanim uzorcima. Za potvrdu rezultata kvantitativne analize mikrokimerizma u SSc-u potrebna je analiza veće količine DNA u većem broju ispitanika uz odabir specifičnijih genskih regija.

sistemska skleroza, mikrokimerizam, fetalni mikrokimerizam, majčinski mikrokimerizam.

nije evidentirano