hrvatski

Sinteza i enzimska hidroliza acetilnih derivata adenozina

Kromatografijom na stupcu DEAE-Sepharose Fast Flow djelomično su pročišćene esteraze iz seruma kunića i zamorca. Iz seruma kunića dobiven je jedan maksimum s esteraznom aktivnošću (K3), a iz zamorca dva (Z2 i Z3). Za ispitivanje esterazne aktivnosti seruma i esteraznih maksimuma kao supstrat je korišten metil-2, 6-di-O-pivaloil-alfa-D-[U-14C]glukopiranozid. Hidrolizom ovog supstrata pokazalo se da K3 i Z3 preferencijalno hidroliziraju pivaloilnu skupinu s položaja 6, dok je Z2 specifičan za položaj 2. Nativnim serumima i pročišćenim esteraznim maksimumima određene su količine proteina i provjerena čistoća SDS elektroforezom na poliakrilamidnom gelu. Priređena su dva acetilna derivata adenozina: 9-beta-D-(2, 3, 5-tri-O-acetilribofuranozil)-1-acetil-6-acetiliminopurin 6 i 9-beta-D-(2, 3, 5-tri-O-acetilribofuranozil)-6-acetilaminopurin 7. U eksperimentalnim uvjetima uobičajenim za enzimske hidrolize O-acilnih derivata monosaharida (DMSO, PBS) adenozinski derivati podliježu hidrolizi izazvanoj medijem, pa moguće enzimske deacilacije nisu mogle biti praćene. Hidroliza izazvana vodenim medijem rezultira uklanjanjem acetila s jedne od sekundarnih OH skupina riboze (2-OH ili 3-OH), te migracijom acetila između ova dva položaja. Produkt hidrolize je smjesa dvaju triacetata sa slobodnom 3-OH 8, odnosno 2-OH 9 (omjer 2:1). Svi sintetizirani spojevi identificirani su klasičnim fizikalno-kemijskim metodama, te 1H NMR i 13C NMR spektroskopijom, a neki od njih i masenom spektroskopijom.

esteraze; serumi kunića i zamorca; enzimske hidrolize; acetilirani derivati adenozina

nije evidentirano