hrvatski

Uloga proteina Pho2 u aktivaciji transkripcije gena PHO5 u kvascu Saccharomyces cerevisiae

U aktivaciji transkripcije gena PHO5, koji kodira za nespecifčnu kiselu fosfatazu u kvascu Saccharomyces cerevisiae, ključnu ulogu imaju specifični aktivator transkripcije protein Pho4 i pleiotropni koaktivator protein Pho2. Za uspješno vezanje tih proteina na promotor te time i aktivaciju transkripcije gena PHO5 od kritične su važnosti interakcije između ta dva proteina. Međutim, eventualni dodatni utjecaj Pho2 na aktivacijsku sposobnost Pho4 kao i doprinos same aktivacijske domene Pho2 u procesu aktivacije promotora PHO5 se još istražuju. U svrhu dobivanja novih spoznaja o koaktivacijskoj ulozi Pho2 proteina, u ovom radu je korišten derivat PHO5 promotora, kod kojeg su mjesta vezanja Pho4 proteina zamijenjena mjestima vezanja Gal4 proteina te je ispitivana aktivacija ovog promotora sa Pho4 ili Pho2 proteinom koji su vezani sa domenom Gal4 proteina koja je odgovorna za vezanje na DNA (Gal4DBD). Vezanje ovih kimernih proteina, Pho4-Gal4DBD kao i Pho2-Gal4DBD na promotor osigurano je preko Gal4DBD te je prema tome neovisno o kooperativnim interakcijama sa drugim proteinom. Tako se mogao pratiti utjecaj interakcija između Pho2 i Pho4 samo na njihovu aktivacijsku sposobnost. U ovom radu pokazalo se da prisutnost nativnog proteina Pho2 doprinosi aktivaciji promotora sa Pho4-Gal4DBD, iako Pho4-Gal4DBD značajno aktivira PHO5 promotor i u odsustvu Pho2. Također je nađeno da Pho2-Gal4DBD može aktivirati promotor bez prisustva nativnog proteina Pho4, iako je i ta aktivacija značajno stimulirana prisustvom nativnog Pho4. Prema tome rezultati ovog rada ukazali su na kooperativno djelovanje Pho4 i Pho2 u procesu aktivacije PHO5 promotora koji slijedi nakon vezanja aktivatora na promotor. Osim toga nađeno je da se i aktivnost proteina Pho2 regulira ovisno o prisutnosti fosfata u podlozi za uzgoj, kao što je to već poznato za Pho4 protein.

Pho2; PHO5; Regulacija transkripcije; Saccharomyces cerevisiae

nije evidentirano