hrvatski

Određivanje spola u nekih vrsta kitova (Cetacea) pomoću lančane reakcije polimerazom

Pri istraživanju biologije kitova znanstvenici često nailaze na probleme prilikom prikupljanja podataka na terenu. Ponekad nije moguće morfološki odrediti spol životinje čije je truplo pronađeno u uznapredovalom stanju truljenja. Također je teško ili čak nemoguće promatranjem u prirodi odrediti spol žive jedinke, budući da u većine vrsta kitova spolni dimorfizam nije izražen. Ovim istraživanjem pokušali smo uvesti pouzdanu molekularno - genetičku metodu kojom bi se određivao spol kitova na uzorcima tkiva uzetih s lešina, kao i na biopsijama kože živih jedinki. Ukupna DNA je izoliranas iz mišićnog tkiva 49 jedinki ; 27 dobrih dupina (Tursiops truncatus), 9 plavobijelih dupina (Stenella coeruleoalba), 7 glavatih dupina (Granozs grusezs), 2 krupnozuba dupina (Ziphius cavirostris), 2 velika sjeverna kita (Balaenoptera physalus) i 2 uzorka neidentificiranih vrsta. U jednom slučaju je DNA izolirana iz kože. Svi su uzorci uzeti s lešina različitih stupnjeva raspadanja. Lančanom reakcijom polimerazom uz tri oligonukleotidne početnice umnoženi su dijelovi ZFY i ZFX homolognih gena na Y- i X- kromosomima. Proizvodi reakcije, različite duljine i specifični za spol, razdvajani su elektroforezom u 1% agaroznom gelu. Uspješno je određen spol na 40 uzoraka. Pokazalo se da metoda nije primjenjiva u slučajevima raspadnutog tkiva, ali je pouzdana i učinkovita kad se primijeni na svježim ili dobro očuvanim uzorcima.

kitovi; spol; PCR

nije evidentirano