hrvatski

Amperometrijski biosenzor s peroksidazom za određivanje ukupnog antioksidativnog kapaciteta

U posljednjih desetak godina na temelju epidemioloških studija prikupljen je veliki broj dokaza koji upućuju na zaključak da prehrana bogata antioksidansima pomaže u prevenciji malignih i kardiovaskularnih bolesti, te nekih bolesti živčanog sustava. Posljedica toga bio je velik porast interesa za razvoj analitičkih metoda za određivanje antioksidativnih svojstvava hrane i bioloških tekućina. Postojeće metode određivanja antioksidativnog kapaciteta uzorka uglavnom su spektrofotometrijske, a temelje se na mjerenju inhibicije oštećivanja biološkog materijala u prisutnosti antioksidansa, ili na gašenju stabilnih slobodnih radikala u prisutnosti antioksidansa. Predmet istraživanja ovog rada bio je razvoj jednostavne, brze i jeftine elektrokemijske metode mjerenja ukupnog antioksidativnog kapaciteta uzorka. Opisana metoda temelji se na biosenzoru s peroksidazom imobiliziranom na površinu elektrode od staklastog ugljika. U prisutnosti vodikova peroksida peroksidaza katalizira oksidaciju 2, 2'-azinobis(3-etilbenzotiazolin-6-sulfonata) (ABTS) u ABTS radikal-kation: Nastali ABTS radikal-kation elektrokemijski se reducira natrag do ABTS-a, pri čemu je struja redukcije proporcionalna koncentraciji radikala. U prisutnosti antioksidansa dolazi do smanjenja koncentracije ABTS radikal-kationa, što za posljedicu ima i smanjenje mjerene struje. U obliku analize s injektiranjem u protok (FIA) razvijena metoda uspješno je primjenjena za određivanje fiziološki najvažnijih antioksidansa (vitamina C i E, mokraćne kiseline i reduciranog glutationa), te za određivanje antioksidativnog kapaciteta njihovih smjesa. Izmjereni antioksidativni kapaciteti, izraženi kao Trolox ekvivalenti, dobro se slažu s literaturnim vrijednostima Trolox ekvivalenata tih tvari. Metoda je primjenjena i za određivanje antioksidativnog kapaciteta uzoraka krvnog seruma, pri čemu je postignuta vrlo visoka korelacija (r2 = 0, 991) s rezultatima dobivenima referentnom TEAC metodom.

antioksidans; biosenzor; peroksidaza; Trolox;

nije evidentirano