engleski

Amperometric Determination of Antioxidative Capacity by 2, 2-Diphenyl-1-Picrylhydrazyl Free Radical

Izuzetno velika pažnja zadnjih desetak godina poklanja se proučavanju oksidacije lipida u hrani. Radi oksidacije lipida hrana gubi na nutritivnim vrijednostima, gubi boju okus i izgled. Dodatkom antioksidanasa koji mogu donirati vodikov atom oksidacija lipida se inhibira, te se zadržava potrebna kvaliteta prehrambenih proizvoda.Također je poznato da prehrana bogata antioksidansima pomaže u prevenciji malignih i kardiovaskularnih bolesti, te nekih bolesti živčanog sustava. Posljedica toga bio je velik porast interesa za razvoj analitičkih metoda za određivanje antioksidativnih svojstva hrane i bioloških tekućina. Postojeće metode određivanja antioksidativnog kapaciteta uzorka temelje se na primjeni kromogenih radikala poput 2, 2'-azinobis(3-etilbenzotiazolin-6-sulfonata) (ABTS) i 2, 2-difenil-1-pikrilhidrazila (DPPH) koji neposredno reagiraju s antioksidansima, a rezultat se najčešće mjeri spektrofotometrijski. U ovom radu prikazana je brza elektrokemijska metoda mjerenja antioksidativnog kapaciteta uzorka koja za razliku od spektrofotometrijskih metoda može biti primjenjena na netransparentne i lipemične uzorke. Reakcijom DPPH s antioksidansom dolazi do redukcije oksidiranog oblika DPPH što rezultira smanjenjm redukcijske struje. DPPH + AH ® DPPH· H + A Smanjenje struje proporcionalno je količini prisutnih antioksidanasa u mjernom uzorku. Kao radna elektroda uporabljena je elektroda od staklastog ugljika, a mjerenja su provedena u klasičnoj troelektrodnoj ćeliji pri potencijalu od 140 mV prema Hg2Cl2/3 M KCl elektrodi. Kao osnovni elektrolit uporabljena je otopina etanola (f = 40%) koja sadrži i 0.033 M KCl, puferirana na pH 7.40 fosfatnim puferom. Metodom se mogu mjeriti koncentracije antioksidansa u području od 0.05 mM do 30 mM. Testirani su vodotopljivi antioksidansi (vitamin C, reducirani glutation, Trolox, L-cistein, galna kiselina, mokraćna kiselina) i alkoholno topljivi polifenoli (katehin, sinapična kiselina, ferulična kiselina, kvercetin). Rezultati dobiveni amperometrijskom metodom uspoređeni su s rezultatima dobivenim spektroskopskim mjerenjem (l = 518 nm). Izmjerene koncentracije antioksidanasa jednom i drugom metodom uspoređene su s koncentracijom Troloxa i izražene kao Trolox ekvivalenti, a postignut koeficijent korelacije R2 = 0.9984 upućuje na dobro slaganje rezultata mjerenja.

Amperometric method; Antioxidant; DPPH; Trolox

nije evidentirano