hrvatski

Genetska raznolikost izolata bakterije roda Leptospira izdvojenih iz životinja u Republici Hrvatskoj

Ukupno 13 izolata bakterije roda Leptospira izdvojenih iz domaćih i divljih životinja iz raznih geografskih područja kontinentalnog dijela Republike Hrvatske identificirano je serološki metodom mikroskopske aglutinacije (MAT) i genetski uporabom modernih metoda molekularne biologije ; raznolikosti dužine restrikcijskih fragmenata 16S rDNK gena (RFLP) te gel elektroforeze u pulsirajućem polju (PFGE). Mikroskopskom aglutinacijom s 23 protuseruma seroloških skupina ustanovljeno je da pet sojeva pripada serološkoj skupini Pomona, po dva soja serološkoj skupini Bataviae, Canicola i Icterohaemorrhagiae i po jedan soj serološkoj skupini Australis i Grippotyphosa. Umnažanjem početnih 330 bp 16S rDNK gena istraživanih sojeva leptospira i mikrorestrikcije umnoženih fragmenata DNK s restrikcijskim enzimima MnlI i DdeI ustanovljeno je da svi pretraživani izolati pripadaju genomskoj vrsti L. interrogans sensu stricto. Makrorestrikcijom čitavu genomske DNK pretraživanih izolata leptospira s restrikcijskim enzimima NotI i SgrAI i gel elektroforezom u pulsirajućem polju ustanovljeni su jedinstveni restrikcijski profili koji su omogućili razlikovanje pojedinih serovara (genotipova) leptospira kao i uvid u njihovu genetsku raznolikost. Rezultati pokazuju da jedan izolat ima sličan restrikcijski profil s referentnim serovarom copenhageni (soj M20), jedan izolat ima sličan profil sa serovarom icterohaemorrhagiae (soj RGA), dva izolata imaju sličan profil sa serovarom bataviae (soj Swart), četiri izolata imaju sličan profil sa serovarom pomona (soj Pomona), jedan izolat ima sličan restrikcijski profil sa serovarom pomona kennewicki (soj LT1026), dva izolata imaju sličan profil sa serovarom canicola (soj Hond Utrecht GP), jedan izolat ima sličan profil sa serovarom lora (soj Lora) i jedan izolat ima sličan restrikcijski profil sa serovarom grippotyphosa (soj Moskva V). Na osnovi dobivenih rezultata smatram da se primjenom molekularnih metoda raznolikosti dužine restrikcijskih fragmenata rDNK za gen 16S i gel elektroforeze u pulsirajućem polju mogu u potpunosti identificirati i analizirati izolati leptospira na razini genomske vrste i serovara (genotipa) te ustanoviti genetske raznolikosti među njima. Budući da sam od 13 izolata leptospira na osnovi analize razlika u restrikcijskim profilima ustanovio 8 različitih serovara, može se zaključiti da u Republici Hrvatskoj, osobito u nizinama Save i Drave postoji velika genetska raznolikost leptospira unutar jedne genomske vrste, Leptospira interrogans sensu stricto.

leptospira; genetska raznolikost; restrikcijski profil

nije evidentirano