hrvatski

Razvoj elektrokemijskih metoda mjerenja antioksidativne aktivnosti

U radu je prikazan razvoj elektrokemijskih metoda mjerenja antioksidativne aktivnosti temeljenih na reakciji između 2, 2'-azinobis(3-etilbenzotiazolin-6-sulfonat) (ABTS) radikal-kationa i antioksidansa. Ispitivanja elektrokemijskog ponašanja ABTS-a, provedena kombinacijom spektroelektrokemijskih, voltametrijskih i kronopotenciometrijskih tehnika, pokazala su da je ABTS radikal-kation jedini produkt njegove elektrokemijske oksidacije u području potencijala između 350 i 650 mV, te da se nastali ABTS radikal-kation može reverzibilno reducirati natrag do ABTS-a. Pokazano je da se ABTS radikal-kation uspješno može generirati kontinuirano, elektrokemijskom oksidacijom otopine ABTS-a u protočnoj elektroliznoj ćeliji. Povezivanjem takvog načina generiranja ABTS radikal-kationa s analizom ubrizgavanjem u protok razvijena je brza i jednostavna metoda određivanja antioksidativne aktivnosti, kod koje je izbjegnuta potreba da se reagens koji sadrži ABTS radikal-kation posebno priprema prije izvođenja analize, kao što je to slučaj kod klasične TEAC (Trolox Equivalent Antioxidant Capacity) metode. U radu su razvijene i metode određivanja antioksidativne aktivnosti kod kojih se smanjenje koncentracije ABTS radikal-kationa uslijed reakcije s antioksidansima prati elektrokemijski, mjerenjem struje potrebne za njegovu redukciju. Da bi se povećala selektivnost takvog elektrokemijskog mjerenja u sustavima koji sadrže i antioksidanse, za praćenje koncentracije ABTS radikal-kationa uporabljena je biamperometrija na interdigitaliziranoj ultramikroelektrodi, za koju je razvijen i odgovarajući teorijski model. Imobilizacijom enzima peroksidaze na površinu interdigitalizirane elektrode razvijen je jednostavan biosenzor za određivanje antioksidativne aktivnosti, kod kojeg se ABTS radikal-kation potreban za reakciju s antioksidansima dobiva enzimskom oksidacijom ABTS-a vodikovim peroksidom. Metode razvijene u ovom radu primijenjene su za određivanje antioksidativne aktivnosti pojedinačnih spojeva i kompleksnih, realnih uzoraka, i u svim je slučajevima postignuto dobro slaganje s klasičnom spektrofotometrijskom TEAC metodom (r2 > 0, 95).

ABTS; analiza ubrizgavanjem u protok; antioksidansi; biamperometrija; biosenzor; interdigitalizirane ultramikroelektrode

nije evidentirano