hrvatski

Optimiranje sastava razvijača za kromatografsko određivanje vezivnog materijala na povijesnom tekstilu

Cilj ovog magistarskog rada bilo je optimirati sastav mobilne faze za kromatografsko razdvajanje i određivanje aminokiselina u svrhu određivanja komponenti vezivnog materijala na povijesnom tekstilu. Radom je obuhvaćena ultrazvučna ekstrakcija uzorka, hidroliza referentnih proteinskih materijala i vezivnog materijala sa tekstilnog uzorka, razdvajanje aminokiselina u hidroliziranom uzorku pomoću tankoslojne kromatografije te denzitometrijsko određivanje komponenata. Optimiranje sastava pokretne faze provedeno je matematičkim modeliranjem pomoću softwera State – Ease Design Expert 6 i Statistica te putem eksperimenata kojima je uz promjenu sastava pokretne faze određeno ponašanje aminokiselina. Cilj postupka optimiranja bio je postići potpuno razdvajanje mrlja čistih standardnih otopina aminokiselina jednodimenzionalnom tankoslojom kromatografijom. Kao pogodan kriterij za optimiranje odabran je faktor separacije (RS) koji uzima u obzir udaljenost mrlja kao i njihovu veličinu. Rezultat optimiranja je definirani sastav razvijača butanol– octena kiselina– voda = 60.14: 18.77: 21.09, v/v. Proračunom dobivene vrijednosti parametara RF i RS izračunate za optimalni sustav uspoređene su sa eksperimentalnim vrijednostima i određeno je vrlo dobro slaganja parametara. Aminokiseline su vizualizirane pomoću različitih reagensa za vizualizaciju, pri čemu su imale karakteristična obojenja, a dobiveni kromatogrami snimljeni su i obrađeni denzitometrijski. Identifikacija proteina u vezivu provedena je prema ranije određenim RF vrijednostima pojedinih aminokiselina te prema njihovim karakterističnim obojenjima nakon vizualizacije. Ova jednostavna i brza kromatografska metoda za određivanje sastava veziva primijenjena je na realnom uzorku povijesnog tekstila, na svilenoj zastavi Sv. Juraja i Sv. Pavla staroj 200 godina.

povijesni tekstil; vezivni materijal; aminokiseline; proteini; tankoslojna kromatografija; optimiranje sastava mobilne faze

nije evidentirano