hrvatski

Blokiranje signalnog puta Hh-Gli u primarnim kulturama dermoida ovarija

Cilj ovog istraživanja bio je uspostaviti nekoliko klonskih linija iz primarne kulture dermoida ovarija koje bi mogle služiti za ispitivanje ekspresije gena signalnog puta Hh-Gli. Utvrdila sam da su dermoidi heterogeni tumori na osnovu razlika u ekspresiji pojedinih gena signalnog puta Hh-Gli. Za takva istraživanja razvila sam metodu RT-PCR, koja mi je također poslužila u pokusima inhibicije signalnog puta Hh-Gli ciklopaminom, jer sam pratila promjene ptch i gli1 nakon blokiranja i ponovnog pokretanja tog puta pomoću Shh proteina. Uspjela sam uspostaviti 6 klonskih linija koje su pokazale različite razine ekspresije glavnih gena signalnog puta Hh-Gli ovisno o koncentraciji HS(humanog seruma). U dva klona, 1933/05-2 10 % HS i 1933/05-4 10% HS, sam dobila povećanu ekspresiju smo i gli1, u druga dva klona, 1933/05-2 10 % HS i 1933/05-6 10 % HS povećanu ekspresiju gena ptch. U pokusima inhibicije signalnog puta ciklopaminom u dva klona, 1933/05-2 i 1933/05-6, signalni put sam uspjela pokrenuti sa proteinom Shh nakon prethodne inhibicije ciklopaminom, dok klon 1933/05-4 nije odgovorio na inhibiciju dodavanjem ciklopamina, neovisno o udjelu HS. Ovim radom sam odredila uvjete kojima se mogu detaljnije izučavati mehanizmi prijenosa signala putem Hh-Gli, uvjeti i učinci raznih supstanci.

signalni put Hh-Gli; primarna kultura; qRT-PCR; dermoidi ovarija; ciklopam in; tomatidin; Shh protein

nije evidentirano