Nalazite se na CroRIS probnoj okolini. Ovdje evidentirani podaci neće biti pohranjeni u Informacijskom sustavu znanosti RH. Ako je ovo greška, CroRIS produkcijskoj okolini moguće je pristupi putem poveznice www.croris.hr
izvor podataka: crosbi !

Regulation of collagen chain alpha1(I) gene transcription (CROSBI ID 330580)

Ocjenski rad | doktorska disertacija

Bedalov, Antonio Regulation of collagen chain alpha1(I) gene transcription / Marušić, Ana (mentor); Zagreb, Medicinski fakultet u Zagrebu, . 1998

Podaci o odgovornosti

Bedalov, Antonio

Marušić, Ana

engleski

Regulation of collagen chain alpha1(I) gene transcription

Kolagen tipa I, proizvod različitih vrsta stanica vezivnog tkiva, pokazuje vrlo složenu transkripcijsku regulaciju koja je pod utjecajem različitih razvojnih i hormonskih čimbenika. Poznavanje molekulskih mehanizama koji sudjeluju u tkivno specifičnoj regulaciji gena kolagena tipa I preduvjet je za razumijevanje ovih zbivanja. Ekspresija transgena sastavljenog od 3.6 kb 5' štakorskog COL1A1-promotora vezana uz gen reporter kloramfenikol-acetiltransferazu (CAT), ColCAT3.6 i niz njegovih delecija proućavana je u tkivima transgeničnih miševa da bi se odredili cis-elementi u promotoru COL1A1-geana koji posreduju visoku razinu prepisivanja ovog gena u različitim stanicama vezivnog tkiva. Izražajnost ColCAT3.6-transgena bila je najveća u tkivima koja proizvode velike količine kolagena tipa I, kosti, tetivi i koži dok je u mozgu i jetri, u kojima je proizvodnja kolagena niska, aktivnost transgena također bila niska. Međutim, aorta je, unatoč visokoj proizvodnji kolagena, imala nisku razinu izražajnosti transgena. Uključivanje prvog introna u test plazmid nije promijenilo raspored ekspresije transgena u tkivima. Nasuprot ovim rezultatima, aktivnost humanog kolagenskog minigena sastavljenog od 2.3 kb 5' promotora, eksona i introna 1-5 i 46-51 i 2 kb 3' od COL1A1-gena, u aorti transgeničnih mišđeva bila je vrlo visoka. OVi rezultati pokazuju da su elementi koji kontroliraju izražajnost COL1A1-gena u GMS različiti od elemenata kojima se koriste osteoblasti i fibroblasti tetive i kože te da su smješteni unutar tijela COL1A1-gena, u eksonima ili intornima 2-5, 46-51 ili unutar 2 kb 3' od COL1A1-gena. Analiza aktivnosti promotora u kulturama stanica izoliranih iz transgeničnih miševa potvrđuju zaključak da GMS koriste posebne regulacijske elemente, različite od osteoblasta i fibroblasta. Posebnosti regulacije COL1A1-promotora u GMS nisu se mogle pokazati na modelu prolaznih transfekcija. Da bi se ispitala ekspresija CColCAT3.6-transgena u stabilnim transfekcijama najprije su proizvedene SM-3t3 stanice imortalizacijom GMS aorte transgeničnih miševa s ColCAT3.6-transgenom. Ekspresija trajno transfektiranog ColCAT3.6-transgena bila je visoka i slična ekspresiji u fibroblastičnoj NIH3t3 ili osteoblastičnoj ROS17/2.8 liniji unatoč tome što ove stanice nisu pokazale ekspresiju endogenog transgena. Razlike u aktivnosti transfektiranog transgena i transgena koji je naslijeđen kroz zam,etnu lozu ukazuju na važnost tkivno specifične organizacije kromatina u reguilaciji ekspresije COL1A1-gena. Uz pomoć analize niza dlecija ColCAT3.6-transgena na -2295, -1997, -1794, -1763, -1719, -1670 bp u transgeničnom mdelu određene su regije promotora koji posreduje prepisivanje COL1A1-gena u ksti, tetivi i koži. Cis-elementi kopji potiču prepisivanje COL1A1-gena u kosti nalaze se unutar 49 bp COL1A1-promotora između -1719+ i -1670 bp. Slijedovi ove regije promotora vrlo su strogo konzervirani između štakora, miša i čovjeka te vežu proteine iz jezgri svježe izoliranih pilećih osteoblasta. Visoka razina ekspresije u tetivnim fibroblastima određena je elementima između -2.3 i -3.6 kb, između -1719 i -1670 i dodatnim elementima koji se nalaze 3' od -1670 bp a ekspresija u koži određena je elementima između -2.3 i 3.6 kb i između -1719 i -1670 bp. Ovi rezultati pokazuju da različita tkiva koriste različite domene COL1A1-promotora kako bi postigli visku razinu ekspresije. 1,25-dihidroksivitamin-D3, kako je ranije pokazano smanjuje proizvodnju kolagena tipa I u kosti transkripcijskim mehanizmom. U ovom je radu pokazano da 1,25-dihidroksivitamin-D3 smanjuje aktivnost COL1A1-promotora in vivo i u modelu transgeničnih mišjih kalvarija. Ovaj se učinak vrši unutaar -1719 bp promotora. Budući da nije ometen cikloheksamidom, učinak je neovisan o novoj sintezi proteina što ukazuje na izravan učinak 1,25-dihidroksivitamin-D3 receptora na promotor COL1A1-gena.

collagen; DNA transcrition

nije evidentirano

nije evidentirano

nije evidentirano

nije evidentirano

nije evidentirano

nije evidentirano

Podaci o izdanju

88

11.06.1998.

obranjeno

Podaci o ustanovi koja je dodijelila akademski stupanj

Medicinski fakultet u Zagrebu

Zagreb

Povezanost rada

Temeljne medicinske znanosti