hrvatski

Razvoj epiglotisa štakorskog zametka u izotransplantatu

U ovom radu smo istražili do sada nepoznat razvojni potencijal fetalnog štakorskog epiglotisa u izotransplantatu pod čahurom bubrega tj, njegovu diferencijaciju i sposobnost za proliferaciju. Mikrokirurškom metodom pod binokularnom lupom su izolirani štakorski epiglotisi iz 17-dnevnih zametaka štakora Fischer i transplantirani pod bubrežnu čahuru odraslog štakora. U eksperimentalnoj skupini primijenjen je bio tijekom 3 dana i.p. injekcijom DNA demetilirajući agens 5-azaC-5mg/kg. Provedena je klasična histološka i TEM analiza, imunohistokemijska detekcija PCNA i kvantitativna stereološka analiza PCNA ekspresije (numerička gustoća-Nv). Transplantati su pokazali dobro preživljenje. U usporedbi sa stupnjem razvoja u 17-dnevnom fetalnom epiglotisu ustanovili smo klasičnim histološkim metodama i TEM analizom da tijekom 14 dana razvoja na ektopičnom mjestu diferencijacija napreduje. Pronašli smo također da se sposobnost za proliferaciju smanjuje (ekspresija PCNA) nakon transplantacije što je u skladu s pravilom razvojne biologije da proliferacija prestaje u onim stanicama koje se terminalno diferenciraju. Ipak , čini se da u transplantatima nije dostignut stupanj razvoja odraslog epiglotisa koji sadrži elastičnu hrskavicu budući da nismo mogli sa sigurnošću utvrditi prisutnost tipičnih elastičnih vlakana u izotransplantatima. Primjena DNA demetilacijskog sredstva 5-azacitidina povećala je proliferacijsku sposobnost epiglotisa (Nv) u usporedbi s kontrolom bez 5-azaC tretmana što je u skladu sa spoznajom da 5-azacitidin svojim utjecajem na gensku ekspresiju može mijenjati razvoj embrionalnih tkiva i organa. Ovim radom na epiglotisu dat je nov doprinos istraživanju razvojne sposobnosti embrionalnih stanica, tkiva i organa za koje se pretpostavlja da bi mogle poslužiti u svrhu nadomjesne terapije oštećenih tkiva i organa u okviru regenerativne medicine.

metilacija DNA; 5-azacitidin; PCNA; epiglotis

nije evidentirano