hrvatski

Genetička analiza rekombinogenosti profaga lambda u ozračenim bakterijama Escherichia coli

Provedena je genetička analiza rekombinogenosti profaga lambda u bakterijama Escherichia coli ozračenim UV svjetlom. Cilj je bio karakterizirati proces koji se događa u ozračenim bakterijama, a koji onesposobljava profag za mjesno-specifičnu rekombinaciju (s bakterijskim kromosomom) te za homolognu rekombinaciju (s inficirajućim fagom). Pokazano je da u mutantima recB2109 i recD1903, kod kojih su znatno reducirane nukleazne aktivnosti enzima RecBCD, a sačuvana njegova helikazna aktivnost, profag progresivno gubi sposobnost za mjesno-specifičnu i homolognu rekombinaciju na isti način kao i u stanicama divljeg tipa (rec+). Ispitivanja komplementacijske sposobnosti profaga pokazala su da profag koji gubi sposobnost za rekombinaciju ostaje transkripcijski aktivan, odnosno da njegov integritet ostaje sačuvan. Nadalje, križanja fag x fag su pokazala da rekombinacija izvankromosomske DNA nije inhibirana tijekom postiradijacijske inkubacije. Za razliku od mutanata recB2109 i recD1903, u "null"-mutantu recB268 rekombinogenost profaga ostaje potpuno sačuvana. Ovi rezultati pokazuju da je gubitak rekombinogenosti profaga posljedica helikazne aktivnosti enzima RecBCD. Pronađeno je također da rekombinogenost profaga ostaje sačuvana u mutantima ruvA, ruvB, ruvC i recG. (Mutacije u ovim genima oštećuju rekombinaciju na RecBCD putu.) Na temelju rezultata dobivenih u ovom radu može se zaključiti da je gubitak rekombinogenosti profaga posljedica neuspješnog rekombinacijskog popravka oštećenog bakterijskog kromosoma, koji uključuje sve enzime na RecBCD putu.

Escherichia coli; profag lambda; RecBCD; RecG; rekombinacija; rekombinacijski popravak DNA; RuvABC

nije evidentirano