hrvatski

Usporedba triju metoda za detekciju virusa tristeza u uzorcima mandarina

Preliminarnim istraživanjem fitosanitarnog statusa agruma u Hrvatskoj dokazana je velika pojavnost virusa tristeza (Citrus tristeza virus, CTV), jednog od najrasprostranjenijih i najštetnijih patogena agruma. Brze i pouzdane metode za detekciju virusa, osobito sojeva značajnog patogenog potencijala, važne su za utvrđivanje tipa i opsega zaraze te za razvoj strategija kontrole bolesti u voćnjacima i rasadnicima. Primjenom triju različitih metoda detekcije, istražen je CTV-status 12 kultivara mandarine Unshiu (Citrus unshiu Marc.). Primijenjene laboatorijske metode, ELISA (Enzyme Linked Immunosorbent Assay) i DTBIA (Direct Tissue Blot Immunoassay), zasnivaju se na detekciji virusnih proteina upotrebom specifičnih protutijela, a razlikuju se u duljini provođenja testa te načinu pripreme biljnog tkiva za detekciju. Treća primijenjena metoda, tzv. biološko indeksiranje, koristi se u svrhu detekcije i karakterizacije CTV-a na različitim indikatorskim biljkama te je znatno sporija. Kako je DTBIA u nas relativno nova i još uvijek nedovoljno primjenjivana metoda, a procjena je da ima velik potencijal za tzv. screening testove, tj. brzo testiranje velikog broja uzoraka na prisutnost patogena, cilj ovog rada bio je ispitati njenu pouzdanost. U tu svrhu, za detekciju virusa korišteno je različito biljno tkivo (grančice, plodnica, mladi i višegodišnji listovi) sakupljeno u različito doba godine (proljeće, ljeto i zima), te su rezultati uspoređeni s rezultatima ELISA testa i biološkog indeksiranja. U većini slučajeva rezultati DTBIA-analize bili su u skladu s rezultatima preostala dva testa. Pokazali smo da starost testiranog materijala ima velik utjecaj na pouzdanost ove metode. Najpouzdaniji rezultati dobiveni su analizom mladih grančica i listova, starih do godine dana. Navedeni rezultati sugeriraju da je za veću pouzdanost rezultata kod primjene DTBIA metode potrebno dodatno primijeniti ELISA test i/ili biološko indeksiranje.

ELISA; DTBIA; biološko indeksiranje; CTV

nije evidentirano