hrvatski

Pročišćavanje poliklonskog protutijela za akvaporin 2 metodom imunoadsorpcije

Imunizacijom kunića peptidom, kojeg je slijed aminokiselina bio istovjetan C-terminalnom kraju u AQP-1, dobiven je imuni serum koji je obilježavao unutarstanične vezikule i apikalnu membranu u glavnim stanicama sabirnih kanalića štakorskog bubrega. Osim AQP-2, imuni serum je obilježavao i neke druge strukture u bubrezima, što ukazuje da je sadržavao različita poliklonska protutijela. Metodom imunoadsorpcije iz imunog seruma pročišćeno je protutijelo koje je na imunoblotu specifično obilježilo AQP-2, a imunocitokemijski isključivo glavne stanice sabirnih kanalića. U glavnim stanicama sabirnih kanalića u kontrolnih životinja, AQP-2 se nalazio većinom u unutarstaničnim vezikulama, a manjim dijelom u apikalnoj membrani. AQP-2 se nije nalazio u tamnim stanicama, koje sadrže V-ATPazu i ne sudjeluju u reapsorpciji vode. U dehidriranih životinja došlo je do premještanja AQP-2 iz unutarstaničnih vezikula u apikalnu membranu, što se vidjelo imunocitokemijski, povećanom ekspresijom antigena u apikalnoj membrani glavnih stanica, i imunoblotom, povećanom količinom antigena u izoliranim staničnim membranama.

akvaporini; kanali za vodu; protutijelo

nije evidentirano