hrvatski

Utjecaj metil-transferaze Sgm na brzinu rasta bakterije Escherichia coli BL21(DE3)pGroESL

Aminoglikozidni antibiotici su među najkorištenijim antibioticima danas, te se zbog njihove široke upotrebe sve češće javlja otpornost bakterija na njihovo djelovanje. Postoji nekoliko tipova mehanizama nastanka otpornosti na aminoglikozide. Jedan od tih mehanizama je stvaranje enzima iz skupine ribosomskih metil-transferaza, što je ishodno prirodan mehanizam obrane za bakterije koje proizvode vlastite antibiotike, no u novije se vrijeme proširio i na patogene sojeve. Metil-transferaza Sgm je enzim koji metilira nukleotid G1405 u 16S rRNA na manjoj podjedinici bakterijskog ribosoma, te tako onemogućava vezanje aminoglikozidnih antibiotika. Nukleotid G1405 se nalazi u sklopu veznog mjesta A na ribosomu, gdje se prilikom prevođenja mRNA veže odgovarajuća aminoacil-tRNA, prepoznajući odgovarajući kodon. S obzirom da je to funkcionalno mjesto ribosoma evolucijski visoko očuvano, za pretpostaviti je da bi njegova promjena mogla utjecati na ekspresiju proteina. Ispitan je utjecaj prisutnosti metil-transferaze Sgm na brzinu rasta bakterijskih sojeva BL21(DE3)pGroESL/pET-25b(+) i BL21(DE3)pGroESL/pET-25b(+)-sgm u različitim uvjetima rasta, na tri različite temperature (30°C, 37°C i 42°C) i na dva različita medija ( bogati LB-Lennox i minimalni M9 glukozni medij). Utvrđena je razlika u generacijskom vremenu između ova dva soja, gdje soj koji sadrži sgm gen napreduje sporije, pri svim uvjetima rasta. Dobiveni rezultati upućuju na to da bi dodatna metilacija G1405 nukleotida u visoko očuvanom A mjestu ribosoma mogla utjecati na brzinu biosinteze proteina, zbog čega će bakterijska stanica biti spremna za diobu kasnije od bakterije koja ne sadrži gen za metil-transferazu Sgm. Stanice koje sadrže metil-transferazu Sgm imaju prednost za rast isključivo u prisutnosti aminoglikozidnih antibiotika.

metil-transferaza Sgm; aminoglikozidni antibiotici; otpornost na antibiotike; krivulja rasta; generacijsko vrijeme

nije evidentirano