hrvatski

Imunokemijska analiza gangliozida u jetri djelomično hepatektomiranih štakora tretiranih hiperbaričnim kisikom

Ciljevi ovog istraživanja bili su odrediti ekspresiju gangliozida i broj apoptotskih stanica u regenerirajućoj jetri ovisno o primjenjenom protokolu izlaganja hiperbaričnom kisiku (HK). Pokusi su rađeni na mužjacima štakora soja Wistar, starosti četiri tjedna. Životinje su podvrgnute operativnom zahvatu 15%-tne djelomične hepatektomije (DH). Deset životinja nije operirano i nije tretirano hiperbaričnim kisikom, pa je stoga služilo kao kontrola. Trideset štakora podvrgnuto je operativnom zahvatu DH te su podijeljeni u 3 skupine: skupina koja se nakon DH oporavljala pri normalnim okolišnim uvjetima tlaka kisika (nonHK skupina), skupina koja je predtretirana s HK prije DH te se oporavljala pri normalnim okolišnim uvjetima (preHK skupina), te skupina koja se oporavljala pod HK nakon DH (postHK skupina). Gangliozidi su određeni imunokemijskim metodama na tankoslojnim kromatogramima visokog razlučivanja (high performance thin layer chromatography, HPTLC) a broj apoptotskih stanica određen je metodom TUNEL. Rezultati istraživanja ukazuju da primjena HK prije DH značajno povećava ekspresiju GM3(Neu5Ac) i GM3(Neu5Gc), dok primjena HK nakon DH lagano povećava ekspresiju GM3(Neu5Ac) te značajno GM3(Neu5Gc). Primjena HK poslije DH, a posebice prije DH, povećava ekspresiju gangliozida neolaktoserije, gangliozida GM2 te GalNAc-GM1b. Osim toga, profil ekspresije pojedinih gangliozida neolaktoserije mijenja se ovisno o primjeni HK prije ili poslije operacije. Primjena HK prije DH rezultira povećanom ekspresijom gangliozida GD1a, biljega prijelazne faze regeneracije jetre u kojoj je biosinteza najintenzivnija, te smanjenom ekspresijom GT1b. Ovaj nalaz GT1b upućuje na mogući povoljan učinak HK na regeneraciju jetre putem aktivacije specifične endogene sijalidaze. Primjena HK nakon DH potiče ekspresiju gangliozida GD3, poznatog aktivatora smrti stanice. Broj apoptotskih stanica bio je najniži u jetri preHK skupine, statistički značajno različit u odnosu na nonHK i postHK skupinu, kod koje je pronađeno pet puta više apoptotskih stanica. Rezultati ovog doktorskog rada ukazuju na moguće sudjelovanje dosad neistraženih gangliozidnih frakcija u regulaciji regeneracije jetre, posebice u uvjetima hiperbarične oksigenacije.

imunokemija; gangliozidi; djelomična hepatektomija; hiperbarična oksigenacija; apoptoza

nije evidentirano