hrvatski

Utjecaj indometacina na ekspresiju galektina-1 u staničnoj liniji ljudskih monocitnih stanica THP-1,

Galektini su proteini iz skupine lektina koji putem specifičnih interakcija sa β -galaktozidnim strukturama glikokonjugata sudjeluju u interpretiranju bioloških informacija pohranjenih u glikokonjugatima. Točna uloga galektina nije u potpunosti razjašnjena, ali poznato je kako sudjeluju u mnogim fiziološkim i patofiziološkim procesima. Interes ovog rada je galektin-1, prvi otkriven galektin. Galektin-1 ima raznovrsne biološke uloge, između ostalog, modulira imuni odgovor utječući na homeostazu i preživljenje imunih stanica, tijek upale i alergija, sudjeluje u ostvarivanju interakcija između patogena i domaćina, a promjene njegove ekspresije uočene su i u različitim tumorima. Tvari s imunomodulatornim djelovanjem, podskupina kojih su nesteroidni protuupalni lijekovi, često ste koriste u liječenju brojnih oboljenja, a novija saznanja pokazuju da njihov učinak nije samo rezultat inhibicije ciklooksigenaze, već i modulacije signalnih puteva i aktivnosti transkripcijskih faktora kojima se, između ostalog, regulira i ekspresija galektina-1. U ovom radu pozornost je usmjerena na utjecaj indometacina na ekspresiju galektina-1 u staničnoj liniji ljudskih monocitnih stanica THP-1. Kako indometacin nije topljiv u vodi, za potrebe rada otopljen je u DMSO, te je paralelno bilo potrebno ispitati učinak otapala na stanice. Bojanjem tripanskim modrilom i MTS test dokazano je kako DMSO u primijenjenoj koncentraciji nema utjecaj na vijabilnost i metaboličku aktivnost stanica, te je stvoren preduvjet za nastavak pokusa. Istim je metodama utvđeno kako indometacin koncentracija 0, 1 µ M, 1 µ M, 5 µ M i 10 µ M ne djeluje citotoksično na stanice. Nakon Western blot analize staničnog homogenata, metodom pojačane kemiluminescencije snimljene su vrpce aktina i galektina-1 na autoradiografskom filmu. Aktin je stanični konstitutivni protein čija se ekspresija ne mijenja pod utjecajem različitih kemijskih tvari. Proteinske vrpce na filmovima analizirane su metodom denzitometrije, a rezultati su izraženi kao relativna površina vrpci galektina-1/aktina u odnosu na relativnu površinu vrpci galektina-1/aktina kontrolnog uzorka. Statistička obrada rezultata pokazala je kako indometacin u koncetracijama 0, 1 µ M, 1 µ M, 5 µ M i 10 µ M ne uzrokuje promjenu ekspresije galektina-1 u ispitivanim stanicama. Rezultati ovoga rada predstavljaju korak k boljem razumijevanju djelovanja indometacina kao i rasvjetljavanju mehanizma regulacije galektina-1 u imunim stanicama.

indometacin; upala; galektin-1

nije evidentirano