hrvatski

Razvoj SPE-HPLC metode za određivanje mitotana u plazmi

Karcinom kore nadbubrežne žlijezde je iznimno rijedak i agresivan oblik tumora koji se najčešće javlja kod žena u srednjoj životnoj dobi. Mitotan je "zlatni standard" za liječenje metastatskog oblika bolesti, odnosno adjuvantni kemoterapeutik nakon resekcije. Premda je u upotrebi već nekoliko desetljeća nije poznat njegov točan mehanizam djelovanja kao ni farmakokinetika. Objašnjenje se može naći u činjenici da od karcinoma kore nadbubrežne žlijezde boluje manje od 4000 ljudi u Europskoj uniji te stoga mitotan spada u skupinu tzv. lijekova siročadi. Terapija mitotanom započinje nižim dozama (1–6 g/dan) te se doza postupno povećava dok se ne postigne terapijska koncentracija (14–20 µg/ml). Obzirom da mitotan izaziva opasne nuspojave iznimno je važno odrediti njegovu točnu koncentraciju u plazmi. Stoga je cilj ovog rada bio razviti i validirati SPE-HPLC metodu za određivanja mitotana u plazmi pacijentice oboljele od adenokortikalnog karcinoma. Uzorak krvi pacijentice sakupljen je 4 sata nakon uzimanja jedne tablete Lysodrena® (500 mg). Kao slijepa proba korištena je pomiješana plazma tri dobrovoljna davatelja koja nisu konzumirali nikakve lijekove. Prije analize uzorci su pročišćeni primjenom kolona za ekstrakciju na čvrstoj fazi Discovery DSC-18, 500 mg, 3 mL (Supelco). SPE kolone kondicionirane su s metanolom i acetonitrilom, dok je za eluaciju mitotana korišten acetonitril. Tekućinska kromatografija provedena je na instrumentu Agilent 1100 koristeći obrnuto-faznu kolonu Symmetry C18, dimenzija 150 × 4, 6 mm i veličine čestica 3, 5 μm (Waters). Korišten je izokratni protok mobilne faze (acetonitril : MiliQ voda : mravlja kiselina = 90 : 10 : 0, 1), 1 mL/min. Kromatogrami su snimljeni pri valnoj duljini 230 nm. Predložena metoda pokazala se prikladnom za određivanje mitotana u plazmi te je u plazmi pacijentice određena koncentracija mitotana od 12, 68 μg/mL.

Mitotan; ekstrakcija na krutoj fazi; tekućinska kromatografija visoke djelotvornosti; validacija metode

nije evidentirano