hrvatski

Prilog genetičkoj karakterizaciji popravka krivo sparenih baza u DNA

Popravak krivo sparenih baza uklanja replikativne greške iz novosintetizirane DNA te djeluje na heterodupleksne rekomibnacijske intermedijere tako da sprečava rekombinaciju. U ovom radu ispitivan je metil-dirigirani popravak krivo-sparenih baza te popravak deaminiranog 5'-metil-citozina (VSP popravak) u E. coli transfekcijom heterodupleksima dobivenim od odijeljenih lanaca od dva različita faga lambda, križanjem faga lambda, te mjerenjem spontane mutageneze. Metil-dirigirani sistem ovisi o mutHLSU funkcijama. Ispitano je da li akumulacija jednolančanih lomova zbog defekta u ligazi omogućava popravak u mutH mutatoru. U ovim eksperimentima uočeno je slabo ali signifikantno smanjenje frekvencije spontanih mutacija u mutH ligts soju. Ispitivan je popravak heterodupleksa sa velikom jednolančanom petljom. Rezultati transfekcije pokazuju da se takve velike nehomologije ne popravljaju Mut sistemom. Rezultati transfekcije uvrA, recA, recBC i recF mutanata ukazuju da poznati ekscizijski i rekombinacijski sistemi u E. coli ne popravljaju ove strukture. Transfekcijski eksperimenti su, kao i križanja faga lambda s hiperrekombinacijskim markerom, pokazali da za VSP popravak treba kompletni enzim DNA polimeraza I. Endonukleazne aktivnosti Nth, Nfo i Xth nisu potrebne za VSP popravak.

metil-dirigirani popravak krivo sparenih baza; transfekcija heterodupleksima; velike jednolančane petlje; mutageneza; VSP popravak; križanja faga lambda; DNA polimeraza I; endonukleaze

nije evidentirano