hrvatski

Molekularna epizootiologija leptospiroze u mišolikih glodavaca

U ovom istraživanju, provedenom na području istočne Slavonije, istraživala sam stupanj kliconoštva leptospira u rezervoara te izdvojila, identificirala i tipizirala izolate leptospira do razine genomske vrste i serovara. Od ukupno 67 ulovljenih i identificiranih mišolikih glodavaca najzastupljenija vrsta bila je A. agrarius (43, 3%), zatim A. flavicollis (29, 8%), A. sylvaticus (13, 4%), S. araneus (8, 9%), C. glareolus (1, 5%), M. avellanarius (1, 5%) i M. arvalis (1, 5%). Nacjepljivanjem tkiva bubrega 67 ulovljenih životinja izdvojila sam 20 izolata leptospira te ustanovila stupanj kliconoštva od 29, 9%. Od 20 izolata deset (50, 0%) sam izdvojila iz vrste A. agrarius, pet (25, 0%) iz vrste A. flavicollis, tri (15, 0%) iz vrste A. sylvaticus, jedan (5, 0%) iz vrste M. avellanarius i jedan (5, 0%) iz vrste M. arvalis. Po prvi puta izdvojila sam leptospire iz vrste M. avellanarius što potvrđuje njenu ulogu u epizootiologiji i epidemiologiji leptospiroze. Izdvojene leptospire identificirala sam i tipizirala do razine serološke skupine mikroskopskim aglutinacijskim testom, do razine genomske vrste lančanom reakcijom polimerazom u stvarnom vremenu, a do razine serovara gel elektroforezom u pulsirajućem polju, monoklonskim protutijelima i unakrižnom aglutinacijom-adsorpcijom. Mikroskopskim aglutinacijskim testom ustanovila sam da deset (50, 0%) izolata pripada serološkoj skupini Pomona, šest (30, 0%) serološkoj skupini Australis, dva (10, 0%) serološkoj skupini Sejroe, jedan (5, 0%) serološkoj skupini Grippotyphosa i jedan (5, 0%) serološkoj skupini Bataviae. Lančanom reakcijom polimerazom potvrdila sam prisutnost DNK patogenih leptospira u svim uzorcima DNK izdvojenim iz kultura izolata i tkiva bubrega pripadajućih životinja. Lančanom reakcijom polimerazom u stvarnom vremenu ustanovila sam da 12 (60, 0%) izolata iz seroloških skupina Pomona, Bataviae i Grippotyphosa pripada genomskoj vrsti L. kirschneri, šest (30, 0%) izolata iz serološke skupine Australis genomskoj vrsti L. interrogans, a dva (10, 0%) izolata iz serološke skupine Sejroe genomskoj vrsti L. borgpetersenii. Gel elektroforezom u pulsirajućem polju i unakrižnom aglutinacijom-adsorpcijom ustanovila sam da deset (50, 0%) izolata iz serološke skupine Pomona pripada serovaru Mozdok, šest (30, 0%) izolata iz serološke skupine Australis serovaru Bratislava, dva (10, 0%) izolata iz serološke skupine Sejroe serovaru Saxkoebing, jedan (5, 0%) izolat iz serološke skupine Grippotyphosa serovaru Grippotyphosa i jedan (5, 0%) izolat iz serološke skupine Bataviae serovaru Bataviae. U ovom istraživanju ustanovila sam izrazito visok stupanj kliconoštva leptospira u rezervoara. Zbog pozitivnog međuodnosa gustoće populacije glodavaca, stupnja kliconoštva i rizika od infekcije, smatram da na istraživanom području postoji veliki rizik od infekcije leptospirama drugih životinja i ljudi. Lančana reakcija polimerazom u stvarnom vremenu prvi je puta primjenjena za determinaciju i određivanje genomske vrste leptospira iz kultura i izravno iz tkiva bubrega mišolikih glodavaca. Uočila sam potpunu podudarnost rezultata dobivenih primjenom ove metode na DNK izdvojenoj iz kultura leptospira i DNK izdvojenoj iz tkiva bubrega pripadajućih životinja što dokazuje da je lančana reakcija polimerazom u stvarnom vremenu primjenjiva u epizootiološkim istraživanjima rezervoara u slučajevima kada izdvajanje leptospira nije moguće. Analizom 20 izdvojenih izolata leptospira ustanovila sam pet serovara leptospira (Mozdok, Bratislava, Saxkoebing, Grippotyphosa i Bataviae) unutar tri genomske vrste (L. kirschneri, L. interrogans i L. borgpetersenii), što odražava izrazito veliku raznolikost izdvojenih izolata obzirom na relativno malu površinu istraživanog područja.

epizootiologija; leptospiroza; glodavci

nije evidentirano