hrvatski

Utjecaj bleomicina na mitotsku aktivnost mre11 i atm mutanata u vrste Arabidopsis thaliana

Mre 11 protein u okviru kompleksa Mre11-Rad50-Xrs2 (MRX kompleksa) ima važnu ulogu u popravcima dvolančanih lomova DNA u somatskim i mejotskim stanicama svih do sada istraživanih organizama, od bakterija do čovjeka. Moguća uloga tog proteina u signalizaciji oštećenja DNA i kontroli staničnog ciklusa u biljaka nije dokazana. S ciljem istraživanja te specifične uloge Mre11 proteina u biljne modelne vrste Arabidopsis thaliana primijenili smo novu tehniku praćenja poremećaja mitoze i kromosoma u stanicama izloženim dvolančanim lomovima DNA. Tehnika se zasniva na tretmanu cvatova (inflorescencija) arabidopsisa, bleomicinom - agensom koji izaziva dvolančane lomove DNA, oporavljanju cvatova nakon tretmana, te analiziranju mitoza u meristemskom tkiva tučkova nakon 24, 48 i 72 sata . Upotrijebili smo cvatove biljaka provjerenog genotipa: divljeg tipa (wt), tri različita mre11 mutanata koji se razlikuju se prema mjestu insercije T-DNA u gen MRE11 i mutanta atm-2. Divlji tip biljaka u vremenu 24 sata nakon tretmana bleomicinom pokazuje jaki pad mitotskih aktivnosti, da bi se u idućih 48 i 72 sata mitotska aktivnost povećala i približila onoj prije tretmana. Broj kromosomskih abnormalnosti u biljaka divljeg tipa jako se povećao 24 sata nakon tretmana, a zatim u iduća dva dana je taj broj opadao. Ovakvi rezultati u skladu s očekivanim. Za razliku od biljaka divljeg tipa, sva tri mre11 mutanta nakon tretmana bleomicinom nisu smanjivali mitotsku aktivnost, a time niti zaustavljali svoj stanični ciklus. Broj kromosomskih napravilnosti i poremećaja mitoze se u sva tri mre 11 mutanta kroz sva tri dana neprestano povećavao. Sličan obrazac regulacije mitotskih aktivnosti i kromosomskih nepravilnosti imali su atm-2 mutanti. Postignuti rezultati potvrđuju postavljenu pretpostavku o ulozi Mre11 proteina u signalizaciji oštećenja genoma i kontroli staničnog ciklusa u biljaka.

bleomicin; mre11; atm; Arabidopsis thaliana

nije evidentirano