Osobitosti pročišćavanja genomske DNA iz složenih bioloških suspenzija na metakrilatnim monolitnim kromatografskim nosačima (CROSBI ID 366799)
Ocjenski rad | doktorska disertacija
Podaci o odgovornosti
Ivančić-Jelečki, Jelena
Forčić, Dubravko
hrvatski
Osobitosti pročišćavanja genomske DNA iz složenih bioloških suspenzija na metakrilatnim monolitnim kromatografskim nosačima
Kromatografija je jedna od najvažnijih metoda u izolaciji biomolekula, no zbog veličine i fizičke fragilnosti genomske DNA postavke za njezino uspješno kromatografsko pročišćavanje bitno su različite od onih u izolacijama drugih biomolekula, a sama odvajanja često nije moguće izvoditi na konvencionalnim nosačima. Metakrilatne kolone napravljene su od kontinuirane strukture (monolita), velikih pora. Omogućavaju brzi prijenos mase temeljen na konvektivnom toku pri niskom tlaku. Mehaničke sile koje se razvijaju tijekom postupka su relativno male. U radu je pokazano da je monolitni anionski izmjenjivač CIM DEAE pogodan kromatografski medij za izolaciju, pročišćavanje i koncentriranje genomske DNA iz niza raznovrsnih, složenih bioloških suspenzija (prokariotski i eukariotski stanični lizati, supernatant kulture stanica MRC-5 inficiranih virusom ospica, ljudska plazma, izolati plazmida, uzorci sakupljeni tijekom izolacije rekombinantnog proteina afinitetnom kromatografijom). Pri opisanim i karakteriziranim kromatografskim odvajanjima genomska DNA je bila prisutna samo u vrhu koji se pojavljuje tijekom elucije, a dobiveni izolati bili su dovoljne čistoće i kvalitete za molekularno-biološke analize kao što su detekcija i precizno određivanje količine DNA kvalitativnom i kvantitativnom lančanom reakcijom polimerazom.
kromatografska izolacija DNA; genomska DNA; monolitne kolone CIM
nije evidentirano
engleski
Characterization of genomic DNA purification process from complex biological solutions using methacrylate monolithic chromatography media
nije evidentirano
DNA chromatographic isolation; genomic DNA; CIM monolithic column
nije evidentirano
Podaci o izdanju
116
22.12.2010.
obranjeno
Podaci o ustanovi koja je dodijelila akademski stupanj
Prirodoslovno-matematički fakultet, Zagreb
Zagreb