hrvatski

Utjecaj PBN-a (N-tert-butil-α-fenilnitron) na razvoj placente i štakorskoga zametka tretiranih 5-azacitidinom in vivo i in vitro

Istraživao se utjecaj PBN-a (N-tert-Butyl-a-phenylnitrone) na razvoj placente i organa fetusa ženki tretiranih teratogenom 5-azacitidinom (5-azaC) kao i direktan utjecaj PBN-a i 5-azaC na zametak u najkritičnijem periodu razvoja (gastrulacija) in vitro. Štakoricama Fischer se 12. i 13. dana gestacije injektirao 5-azacitidin (5 mg/kg), PBN (40 mg/kg) ili PBN, pa nakon 1 sata 5-azaC ili otapalo. Mikrokirurški izolirani 9, 5 dana stari zameci su kultivirani in vitro u Eaglovom MEM-u uz dodatak 5–azaC (5 µM) i / ili PBN-u (22.6 µM), a kontrole u MEM-u sa ili bez dodatka štakorskog seruma (50%). Mjereni su promjeri eksplantata. Rezultati su uspoređeni neparametrijskim statističkim testovima. Predtretman s PBN-om značajno je povećao masu placente tretirane s 5-azaC 15. dana. Numerička gustoća (Nv) za PCNA u posteljicama 20.dana bila je značajno manja u obje grupe tretirane s 5-azaC, a apoptotički indeks veći. U jetri 15-dnevnih zametaka predtretman s PBN je značajno (na razinu kontrolne) povećao ekspresiju PCNA (Nv) smanjene sa 5-azaC, a u hrskavici je Nv za PCNA bio značajno veći u obje 5-azaC tretirane skupine. U in vitro uvjetima PBN je poboljšao rast eksplantata tretiranih s 5-azaC, ali i u kontroli (MEM). Može se zaključiti da je predtretman sa PBN-om poboljšao razvoj placente, a u jetri tkivno-specifično normalizirao staničnu proliferaciju. Ex vivo u kemijski definiranom mediju bez proteina je ustanovljen blagotvorni učinak samog PBN-a na zametak što nije ustanovljeno u puno kompliciranijem sustavu in vivo. Ovi rezultati su od značaja za posve nove terapijske strategije u kojima se u humanoj medicini koriste epigenetski lijek 5-azaC i antioksidans PBN.

5-azacitidin; PBN; posteljica; zametak; štakor; apoptoza; PCNA; proliferacija

nije evidentirano