hrvatski

Indukcija duplikacije kromosoma u kvasca Saccharomyces cerevisiae

Genomi složenih eukariota, uključujući i genom čovjeka, bogati su istosmjernim ponavljanjima, sljedovima nukleotida koji mogu potaknuti rekombinaciju "pop-out" uzrokujući gubitak genetičkog materijala čime je ugrožena stabilnost genoma. Ipak, stanica iskorištava rekombinaciju "pop-out" za popravak dvolančanog loma modelom komplementarnog sparivanja jednolančanih krajeva (eng. single strand annealing, SSA) tijekom kojeg se oslobađaju dvije jednolančane molekule DNA za koje je u ovom radu ispitana vjerojatnost ugradnje u genom kvasca. U tu svrhu konstruiran je eksperimentalni sustav (soj kvasca S. cerevisiae) u kojem je SSA moguće potaknuti pomoću endonukleaze I-SceI. Međutim, iako je SSA induciran u približno 3•109 stanica kvasca, nije zabilježen niti jedan rekombinant u kojemu je nastupila ugradnja jednolančane DNA. U istom eksperimentalnom sustavu detektirana je duplikacija kromosoma, a njena učestalost proporcionalna je učestalosti rekombinacije “pop-out”, što ukazuje na mogućnost da SSA-mehanizam ima važnu ulogu u evoluciji eukariotskog genoma. Pored toga, razvijeni eksperimentalni sustav može se primijeniti u konstrukciji i održavanju sojeva kvasca koji sadrže dvije kopije željenog kromosoma.

popravak dvolančanog loma; komplementarno sparivanje jednolančanih krajeva (SSA); nestabilnost genoma; duplikacija kromosoma; Saccharomyces cerevisiae

nije evidentirano