hrvatski

IZLUČIVANJE HETEROLOGNO EKSPRIMIRANIH PROTEINA U KVASCA Pichia pastoris POMOĆU SEKVENCIJE α-MF

Metilotrofni kvasac Pichia pastoris je izvrstan domaćin za ekspresiju heterolognih proteina. Lako se uzgaja na jednostavnoj hranjivoj podlozi, a uporaba promotora gena AOX1 nudi prednosti kontrolirane i učinkovite indukcije. Ovaj kvasac izlučuje malu količinu endogenih proteina, zbog čega heterologno eksprimiran i izlučen protein čini većinu proteina hranjive podloge, što olakšava proces njegovog pročišćavanja. Ipak, većina visokomolekularnih proteina se ne izlučuje u podlogu već ostaje u periplazmi stanice. Kako bi se kvasac P. pastoris ustanovio kao učinkovit domaćin za ekspresiju ovih proteina, nužno je poboljšanje njegovog sekretornog kapaciteta. U ovom radu opisan je pokušaj izlučivanja tri modelna proteina fuzijom sa signalnom sekvencijom α-MF iz kvasca Saccharomyces cerevisiae. Osim toga, istražen je i utjecaj razine ekspresije nekih gena koji sudjeluju u izgradnji stanične stijenke na sekretorni kapacitet kvasca P. pastoris.

izlučivanje heterolognih proteina; kvasac P. pastoris; sekvencija α-MF; stanična stijenka

nije evidentirano