hrvatski

Jetreni imunosni odgovor u tijeku MCMV infekcije i aktivacije NKT stanica

Istraživali smo učinke stimulacije NKT stanica sa αGalCer na infekciju miševa sa mišjim citomegalovirusom (MCMV). Pri tome, prikazani su rezultati istraživanja učinaka αGalCer na imunosni sustav miševa u tijeku MCMV infekcije kao i djelovanje te tvari na učinkovitost čišćenja virusa iz organizma. Naša istraživanja proveli smo u tri različita protokola primjene αGalCer i infekcije miševa MCMV-om. U prvom protokolu primjenili smo jednokratnu injekciju αGalCer istovremeno sa infekcijom miševa, te idući dan žrtvovali miševe i određivali fenotipsku zastupljenost limfatičnih stanica u jetri i slezeni miševa. Pored toga određivali smo i aktivacijski/memorijski fenotip stanica tj. zastupljenost CD69, CD44, CD45RB i CD62L pozitivnih stanica na limfocitima T, NKT i NK stanicama. U drugom protokolu αGalCer smo injicirali jednokratno i to 4 dana nakon infekcije, a miševe žrtvovali 5.dan, 7.dan, 11.dan, 15.dan nakon infekcije. U trećem protokolu αGalCer smo inicirali kontinuirano 4., 6., 11., i 14. dan nakon infekcije, uvijek dan prije žrtvovanja miševa, te određivali replikaciju virusa u jetri, kao i aktivacijski fenotip limfocita T, NK i NKT stanica, te zastupljenost limfocita T, NK i NKT stanica. U našim pokusima primjetili smo da kontinuirano davanje αGalCer ne dovodi do smanjenja replikacija MCMV za razliku od miševa koji su jednokratno dobili αGalCer dan prije žrtvovanja miševa. Pored toga, infekcija sa MCMV statistički je značajno smanjila postotak CD69+ na T stanicama te NKT i NK stanicama, dok je u životinjama koje su primile αGal Cer ekspresija ovog biljega na svim ispitivanim staničnim podvrstama porasla. Infekcija MCMV-om dovodi do nakupljanja u jetri tijekom prvih 11 dana infekcije i smanjenja limfocita B (CD19+). Kontinuirana primjena αGalCer u ovih miševa dovodi pomicanja vrška nakupljanja CD3+CD8+ limfocita prema 15. danu infekcije. Višestruko injiciranje αGalCer dovelo je do značajne aumulacije NK stanica u jetri (NK 1.1+ CD3-). U 18-satnom pokusu statistički značajan pad ukupnih CD3+ i CD3+CD8+stanica u slezeni primjećen je u miševa koji su primili αGalCer u odnosu na kontrolnu skupinu, a sličan učinak primjetili smo i u jetri. αGalCer također snižava zastupljenost CD3+CD4+ stanica u jetri i slezeni. Infekcija MCMV neutralizira ovaj učinak αGalCer i pokazuje statistički značajno veću akumulaciju ukupnih CD3+, a zatim i CD3+CD8+ i CD3+CD4+ stanica u odnosu na miševe koji su pored MCMV-a primile i αGalCer no samo u jetri, a ne i slezeni. Infekcija sa MCMV uz primjenu αGalCer u jetri izaziva statistički značajan porast zastupljenosti CD3+NK1.1+ NKT stanica i CD3-NK1.1+ NK stanica u odnosu na miševe koji su primili samo αGalCer. Sama infekcija sa MCMV-om u 18-satnom pokusu statistički je značajno smanjila postotak aktiviranih CD3+/CD69+ limfocita T, te CD3+NK1.1+ NKT stanica i CD3-NK1.1+ NK stanica, dok je, uz infekciju istovremeno davanje αGalCer-a, ekspresiju CD69 biljega obnovilo. U 18-satnom pokusu infekcija sa MCMV-om izaziva statistički značajan pad zastupljenosti NK1.1+CD62L stanica u jetri u odnosu na kontrolnu skupinu i skupinu miševa kojima je injiciran αGalCer. Također statistički je značajno manja zastupljenost CD3+CD44+ stanica u jetri MCMV inficiranih miševa u odnosu na skupine miševa koji su primili αGalCer i MCMV+αGalCer. Na osnovu ovih rezultata moguće je zaključiti da u kontinuirano injiciranje αGalCer dovodi do poticanja Th2 odgovora koji odgovara MCMV-u, dok jednokratna injekcija u uvjetima MCMV infekcije vodi u Th1 odgovor koji olakšava čišćenje virusa. Sama infekcija smanjuje zastupljenost neiskusnih stanica u jetri miševa, a izaziva nakupljanje stanica specifične i nespecifične imunosti koje provode antivirusnu imunost. Jednokratna stimulacija NKT stanica u takvim uvjetima pomaže čišćenju virusa, što se može vidjeti na razini virusne replikacije, ali i na razini imunosnih pokazatelja kao što je zastupljenost pojedinih staničnih podvrsta te analiza njihovog aktivacijsko/memorijskog fenotipa.

Jetreni imunosni sustav; Mišji citomegalovirus; NKT stanice; Alfa-galaktozilceramid

nije evidentirano