hrvatski

Razvoj goveđih zametaka in vitro polučenih iz folikula u različitim stadijima spolnog ciklusa

Biotehnološki postupci (superovulacija, embriotransfer i manipulacija zamecima in vitro) u uzgoju i rasplođivanju domaćih životinja tijekom posljednjih desetljeća intenzivno se koriste u svim zemljama, jer se njihovom primjenom skraćuje genetski interval i dobiva veći broj teladi od genetski elitnih plotkinja, te tako postiže bolja kvaliteta stada. Postupak proizvodnje zametaka in vitro obuhvaća sazrijevanje (IVM), oplodnju (IVF), i uzgoj jajnih stanica (IVC) do stadija blastociste. Ovi postupci uzgoja najviše se koiste u tehnologiji reprodukcije goveda zbog njihove komercijalne vrijednosti. U svrhu istraživanja postupaka in vitro oplodnje iz 70 jajnika zaklanih krava, simentalske pasmine i nepoznate reprodukcijske anamneze aspirirali smo ukupno 1682 folikula promjera do 8 mm. Jajnike smo sakupljali direktno na liniji klanja u razdoblju od lipnja do srpnja 2000. godine. Na osnovi morfološke ocjene, parove jajnika smo razvrstali u tri različite faze spolnog ciklusa, a folikule u dvije kategorije (manji od 3mm i veći od 3mm). Pregledom aspirirane tekućine pronašli smo 737 jajnih stanica, od kojih 475 u kategoriji manjih od 3mm, a 262 u kategoriji većih od 3mm. Uspjeh aspiracije iznosio je 43,8%. Dobivene nezrele jajne stanice morfološki smo ocjenili i svrstali u tri kategorije, od kojih su u postupak dozrijevanja ušle samo jajne stanice I i II kategorije ("dobre" jajne stanice). Odabrane jajne stanice stavili smo u medij za dozrijevanje, te ih nakon 24 sata inkubacije oplodili duboko smrznutom spermom bika, pripremljenom na Percoll gradijentu. Drugog dana nakon oplodnje utvrdili smo postotak brazdanja koji je iznosio 50,6%. Tako dobivene goveđe zametke uzgajali smo u definiranom mediju SOFaaBSA do stadija morule i blastociste. Nakon sedmog dana uzgoja dobili smo 59 (15,8%) M i Bl, a jedanaestog dana 37 (9,9%)Bl i 22 (5,9%)hBl, koje smo klasificirali po standardima IETS-a. Statističkom obradom rezultata, nije utvrđena značajna razlika u sposobnosti uspjeha dozrijevanja, oplodnje i uzgoja jajnih stanica, ni među različitim fazama spolnog ciklusa, niti među kategorijama folikula. Na osnovi rezultata naših istraživanja provedenih u lipnju i srpnju mjesecu 2000. godine, možemo zaključiti da su Makek i sur. (2000.) u proljeće proizveli više transferbilnih zametaka istim protokolom rada, u istom laboratoriju gdje su provedena i naša istraživanja. To nas upućuje da je na dobivene rezultate utjecala sezona u kojoj su provedena istraživanja. Iako krava nije sezonski poliestrična životinja, ljeto je razdoblje njene slabije spolne aktivnosti.

krava; uzgoj in vitro; folikul; zametak

nije evidentirano