hrvatski

Uloga iglC gena u unutarstaničnom životu Francisella Tularensis

Ciljevi su bili odrediti ulogu iglC gena u unutarstaničnom životu F. tularensis subsp. novicida u humanim makrofagima i amebama putem kinetike rasta, modulacije apoptoze, biogeneze fagosoma i ultrastrukturalne organizacije stanica nakon infekcije. tanice A. castellanii i H. vermiformis te humani makrofagi inficirane su s F. tularensis subsp. novicida i njenom mutantom iglC. U određenim vremenskim periodima nakon infekcije stanice su procesuirane za određivanje ukupnog broja bakterija metodom kinetike rasta, stupnja zakiseljavanja fagosoma metodom konfokalne mikroskopije dok je ultrastrukturalana organizacija stanice određivana elektronskom mikroskopijom. Otpornost na apoptozu te aktivacija kaspaze-1 i 3 u humanih makrofaga inficiranih s F. tularensis subsp. novicida ili iglC mutantom određivana je imunofluorescentim bojenjem putem konfokalane mikroskopije. F. tularensis subsp. novicida pokreće jezgrinu translokaciju p65 podjedinice NF-κB u humanim makrofagima, no translokacija NF-κB je defektna kod iglC mutante. Iako se kaspaza-1 i kaspaza-3 pokreću tijekom ranih stadija infekcije humanih makrofaga s F. tularensis subsp. novicida, stanična smrt je odgođena, što je u korelaciji sa simultanom aktivacijom NF-κB. F. tularensis subsp. novicida razmnožava se unutar ameba u fagosomu u kojem nije došlo do acidifikacije dok je iglC mutanta defektna za razmnožavanje u ovim dvjema amebama. Ovo je istraživanje prvi puta pokazalo simultanu modulaciju kaspaze-1, kaspaze-3 i anti-apoptotičnog jezgrinog transkripcijskog čimbenika NF-κB i osjetljivu ravnotežu među njima kako bi se očuvala sposobnost za život inficirane stanice. Francisella može rasti i preživjeti unutar amebe, a iglC je potreban za unutarstanični rast u A. castellanii i H. vermiformis. Za razliku od stanica sisavaca gdje se bakterija razmnožava u citoplazmi u amebama se F. tularensis subsp. novicida razmnožava u fagosomu.

amebe; apotoza; Francisella tularensis; humani makrofagi; iglC

nije evidentirano