hrvatski

Prilagodba stanične linije CCO na rast u mediju bez dodatka seruma

Proliferacija životinjskih stanica u kulturi pod kontrolom je vanjskih faktora rasta najčešće sadržanih u serumu animalnog podrijetla. Korištenje animalnog seruma se nastoji svesti na najmanju moguću mjeru prilikom uzgoja, radi nedovoljnog poznavanja sastava, nepoznatih mehanizama utjecaja na rast, interferencije sa drugim spojevima u mediju, i sl. Kako bi se smanjilo njegovo korištenje, nastoje se proizvesti mediji bez seruma koji osiguravaju zadovoljavajući rast stanica, a stanice koje se nastoji uzgojiti u takvom mediju moraju se na takav uzgoj prilagoditi. Svrha ovog rada bio je pokušaj prilagodbe CCO stanične linije na rast u mediju sa smanjenom koncentracijom seruma. CCO stanična linija spada u adherentni tip stanica koje su ovisne o površini za rast. Kako bi se poboljšao prinos stanica, osim na Multiwell pločama, proveden je i uzgoj na Cytodex 1 mikroosačima u Cell-spin bioreaktorima. Na Multiwell pločama stanice su uzgajane u mediju sa različitim koncentracijama seruma postupnom adaptacijom sa početnih 10% do 0, 1 % seruma. Prilagodba je bila uspješna, pošto je pri svakoj koncentraciji seruma utvrđen porast stanica, pri čemu je u mediju sa najnižom koncentracijom od 0, 1% seruma utvrđen prinos stanica od 7 x10e5 st/mL. U Cell-spin bioreaktorima stanice su uzgajane na Cytodex 1 mikroosačima u 2 različita medija, pri čemu je jedan bio DMEM medij s 5% seruma koji je preporučen za uzgoj CCO stanica od strane proizvođača, a drugi UC medij sa smanjenom koncentracijom seruma od 2%. Stanice su uspješno prilagođene na uzgoj u mediju sa smanjenom koncentracijom seruma, pri čemu je zabilježen prinos stanica od 17x10e5 st/mL.

CCO stanična linija; Cytodex 1 mikronosači; Cell-spin bioreaktor; prilagodba; serum;

nije evidentirano