hrvatski

NOVA METODA MIKRO AGAR DILUCIJE ZA ODREĐIVANJE MINIMALNIH INHIBITORNIH KONCENTRACIJA AMOXICILINA, AZITROMICINA I METRONIDAZOLA ZA IZOLATE HELICOBACTER PYLORI

Cilj: razvoj brzih, i jednistavnih i pouzdanih in vitro metoda ispitiovanja osjetljivosti Helivcobacter pylori (Hp( nužan je zbog sve većih potreba za isoitivanjem osjetljivosti Hp. Razvili smo mikro agar dilucijsku metodu u mikro pločici s 96 jažica. Metode: 100 kliničkih izolata ispitivanih u ovoj studiji je dobiveno kultivacijom na Hp želučanih biopsija dobivenih od bolesnika KB Merkur, Zagreb. Hp ATCC 43504 je također ispitan. Mikro pločice i ploče za standardnu metodu agar dilucije, suspenzije Hp i vrijeme inkubacije su učinjeni preme NCCLS protokolu M7-A4. Mueller-Hintonagar je bio suplementiran s 5 posto ovčje krvi. Bakterijske suspenzije su napravljene u brucella bujonu te turbiditeta 2 MacFarland standarda. U mikro pločice je dodano 0, 001 posto tetrazolum klorida (TTC, Sigma). Dodavanjem TTC kolonije su poprimile zlatnu ili crnu boju. Volumen agara u svakoj jažici je iznosio 400 ml. Bakteriska suspenzija (2ml) je inokulirana u svaku jažicu. (uključujući i kontrolu rasta). Nakon 3 dana sve su ploče očitavane za prisutnost vidljivog porasta. Svi su testovi učinjeni u duplikatu. Rezultati: Svi su sojevi imali indentične MIK-ove za amoxicillin objema metodama. MIK ta azitromicinse razlikovao u 15 sijeva (jedno razrjeđenje razlike i uvijek niže u miro pločici nego u standardnoj metodi). MIK za metronidazole se razlikovao u 9 sojeva na isti način. Rezultati dobivceni mikro agar dilucijom i standardnom agar dilucijom dobro se podudaraju. 100 posto (za amoxicilin) , 85 posto (za azitromicin) i 91 posto (za metronidazol) rezlutata dobivenih mikro i standardsnom metodom nalazi se unutar 1log2 dilucije. Rast Hp na mikro pločama bio je lako uočljiv zbog zlatnog odnosno crnog pigmenta nastalogf dodavanjem TTC. Rasprava: Može se zaključiti da je mikro agar dilucija praktična lako primjenjiva i jednostavna alternativa za određivanje MIK Hp u kliničokm mikrobiološkom labaratoriju.

Helicyobacter pylori; mikrobiologija

nije evidentirano