Uloga aktivnog ugljena u otklanjanju inhibitora lančane reakcija polimerazom u forenzičnim biološkim uzorcima (CROSBI ID 376744)
Ocjenski rad | doktorska disertacija
Podaci o odgovornosti
Barbarić, Lucija
Grubić, Zorana
hrvatski
Uloga aktivnog ugljena u otklanjanju inhibitora lančane reakcija polimerazom u forenzičnim biološkim uzorcima
Forenzični biološki uzorci često sadržavaju male količine DNA uz prisustvo smjese inhibitora umnažanja DNA. Tijekom izolacije DNA s podloge, dijelovi podloge kao potencijalni inhibitori mogu se izolirati zajedno s genomskom DNA čime se smanjuje ili u potpuno onemogućava umnažanje mikrosatelitnih lokusa. Cilj ovog istraživanja je ukloniti inhibitore umnažanja DNA pomoću aktivnog ugljena uz što manji gubitak humane DNA. Kvaliteta izolirane DNA testirana je umnažanjem deset mikrosatelitnih lokusa. Uspoređena je efikasnost neafinitetnih metoda izolacije genomske DNA (Chelex i organska izolacija) kao i metoda pročišćavanja ultrafiltracijom (Amicon komercijalna kolona) i adsorpcijom (aktivni ugljen). Općenito, Chelex se pokazao kao učinkovitija metoda izolacije DNA, a usporedbom metoda pročišćavanja nije bilo statistički značajne razlike u kvaliteti umnožene DNA. Primjena aktivnog ugljena pokazala se jednostavnom, brzom, ekonomičnom i reproducibilnom metodom pročišćavanja. Aktivni ugljen uspješno je adsorbirao hematin, kao prirodni inhibitor iz krvi, bez značajnih gubitaka DNA. Nadalje, smanjena je koncentracija inhibitora iz podloge kao što su humusne tvari iz zemlje i tanini iz drva. Amicon se pokazao kao efikasnija metoda za uklanjanje indiga iz trapera kao podloge. Pročišćavanje bioloških uzoraka temeljeno na fizikalnim i kemijskim svojstvima aktivnog ugljena dosad nije provedeno stoga spoznaje utvrđene u ovom istraživanju daju prvi uvid u novu primjenu dobro poznatog adsorbensa.
forenzični biološki uzorci; inhibicija; aktivni ugljen; hematin; humusne tvari; tanini; indigo boja
nije evidentirano
engleski
The role of activated carbon in elimination of polymerase chain reaction inhibitors in forensic biological samples
nije evidentirano
forensic biological samples; inhibition; activated carbon; hematin; humic substances; tannins; indigo dye
nije evidentirano
Podaci o izdanju
100
20.12.2012.
obranjeno
Podaci o ustanovi koja je dodijelila akademski stupanj
Prirodoslovno-matematički fakultet, Zagreb
Zagreb