hrvatski

Otpornost na insekte postignuta ekspresijom peptida u transformiranim biljkama

Proteazni inhibitori (PI) su široko rasprostranjeni u biljnom svijetu, a djeluju na proteaze probavnog crijeva insekata blokirajući razgradnju proteina. To se odražava kroz usporeni rast kukaca i smanjenje težine, a često djeluje insekticidno. Sinteza PI vezana je uz stadij razvoja biljke i pojedinih biljnih organa, a pojačano ih biljke luče i nakon ozljeđivanja, što predstavlja normalan mehanizam obrane. Ovo zadnje svojstvo pokazatelj je da PI mogu biti korišteni u svrhu oplemenjivanja biljaka za otpornost na kukce. Kako su PI proteini, dakle produkti pojedinih gena, razvojem genetskog inženjerstva (GI) pojavljuje se mogućnost manipulacije njihovim genima i prenošenje iz vrste u vrstu. Sintetizirano je dvanaest gena za inhibitore tripsina koji svi imaju okosnicu jednog PI iz krastavca (sastoji od 29 aminokiselina), a razlikuju se samo u tri aminokiseline u aktivnim mjestima inhibitora. Geni su ugrađeni u vektor pBI 121 za biljnu transformaciju, a vektor u bakteriju Agrobacterium tumefaciens. Bakterije s rekombinantnim vektorima korištene su za genetsku transformaciju duhana (Nicotiana tabacum L. cv. Xanthi) Uspješnost genetske transformacije ispitana je PCR-om (polimeriziranom lančanom reakcijom), a transkripcije unešenih gena RT-PCR-om (reverznom transkripcijom). Efikasnost pojedinih inhibitora analizirana je entomološkim testovima s ličinkama kukca Spodoptera littoralis Boisd. Praćena je težina i mortalitet ličinki hranjenih listovima transformiranih u odnosu na netransformirane biljke.

genetska transformacija; duhan; otpornost na insekte; inhibitori tripsina

nije evidentirano