hrvatski

Konstrukcija mutanta SLX4 kvasca Saccharomyces cerevisiae

Palindromske sekvencije prisutne su u genetičkom materijalu svih živih organizama te su vrlo često uključene u regulaciju fundamentalnih staničnih procesa. Međutim, dulji palindromi mogu u DNA formirati rekombinogene sekundarne strukture koje mogu uzrokovati pucanje kromosoma, genetičke prerasporede i genetičke bolesti kod ljudi. Dosadašnji rezultati sugeriraju da bi za nastanak loma u palindromu u uvjetima in vivo mogao biti odgovoran gen SLX4. Upravo zbog toga je cilj ovoga rada bio provesti inaktivaciju navedenog gena u kvaščevom soju BYUHA-8 koji se otprije koristi za istraživanje rekombinogenosti palindroma. U tu je svrhu najprije lančanom reakcijom polimeraze sintetiziran linearni fragment DNA za inaktivaciju gena SLX4 i tim je fragmentom zatim transformiran kvaščev soj BYUHA-8. Molekularna analiza dobivenih transformanata pokazala je da je u svim transformantima došlo do ilegitimne integracije transformirajuće DNA, a uzrok tome bi mogla biti nedovoljna duljina homologija na krajevima korištenog linearnog fragmenta koja je u ovom radu iznosila 45 parova baza.

palindromi; „ends-out“; ilegitimna inegracija; gen SLX4; homologne regije

nije evidentirano