hrvatski

Razvoj i validacija kromatografske metode za određivanje makrolida u suspendiranim česticama

Farmaceutici, koji se ubrajaju u ''nova zagađivala'', zaokupili su veliku pozornost znanstvenika zbog spoznaje o njihovoj opasnosti i negativnim utjecajima na cjelokupni živi svijet. Kako bi se izbjegle neželjene posljedice potrebno je zakonsko propisivanje maksimalno dopuštenih koncentracija (MDK) i konsantan nadzor ovih tvari u okolišu. U tu svrhu potrebno je razviti analitičke metode separacije farmaceutika iz realnih uzoraka kao i metode kvalitativnog i kvantitativnog određivanja aktivnih farmaceutskih tvari. U ovom radu razvijena je i validirana analitička metoda za određivanje smjese makrolida (eritromicin, klaritromicin, azitromicin, roksitromicin, tilozin i DHL) u suspendiranim česticama. Ciljani analiti su kvalitativno i kvantitativno određivani tekućinskom kromatografijom vezanom sa spektrometrijom masa (HPLC-MS/MS) uz ekstrakciju čvrstom fazom (SPE) kao metodom priprave uzorka. Ispitivani su uvjeti pri kojima je ekstrakcija čvrstom fazom najučinkovitija s obzirom na vrstu sorbensa u koloni, vrstu otapala za eluiranje i različito vrijeme zadržavanja. Kromatografsko razdvajanje optimizirano je s obzirom na sastav pokretne faze, nepokretne faze i način eluiranja (izokratno i gradijentno). Detekcija je izvedena na spektrometru masa s trostrukim kvadripolom pri pozitivnoj ionizaciji elektroraspršenjem. Napon fragmentora i kolizijska energija optimizirani su za svaki pojedini analit kako bi se dobili najbolji uvjeti za identifikaciju određivanih farmaceutika. Snimanja je provedeno praćenjem višestrukih reakcija (MRM) pri kojim se za svaki izvorni spoj prate dva fragmenta za njegovu kvantifikaciju i identifikaciju. Razvijena i optimirana LC-MS/MS metoda je validirana određivanjem izvedbenih značajki: linearnosti, granica detekcije (GD), granica kvantifikacije (GK), osjetljivost, obnovljivosti i ponovljivosti.

farmaceutici; tekućinska kromatografija; spektrometrija masa; suspendirane čestice

nije evidentirano