hrvatski

Utjecaj izvanstaničnog NADH i NAD+ na proliferaciju ljudskih tumorskih stanica

U ovom sam radu ispitivala antiproliferativni učinak reduciranog i oksidiranog oblika izvanstaničnog nikotinamid adenin dinukleotida (NADH i NAD+) na stanice tumora čovjeka: CaCo-2 (adenokarcinom debelog crijeva), Hep-2 (stanice tumora grkljana), MCF-7 (stanice karcinoma dojke), MIA PaCa-2 (stanice tumora gušterače), HeLa (stanice karcinoma grlića maternice), WI 38 (zdravi fibroblasti), HBL (stanice melanoma). Pokusi su izvođeni in vitro. Ispitano je šest različitih koncentracija NADH i NAD+ (100 mg/mL, 400 mg/mL, 550 mg/mL, 700 mg/mL i 850 mg/mL). Proliferacija stanica mjerena je testom MTT. U većini slučajeva NAD+ i NADH djeluju jednoznačano. Uzrokuju: a) postupnu, sve jaču inhibiciju rasta (stanice MIA PaCa-2, HeLa, Hep-2), b) izmjenu (po danima) jačine inhibicije rasta (MCF-7, zdravi fibroblasti), c) postupnu stimulaciju rasta (stanice CaCo-2). Antiproliferativni učinak NADH na stanice tumora gušterače čovjeka (MIA PaCa-2) najveći je petog dana kada sve koncentracije u jednakoj mjeri inhibiraju rast za 70-80%. Jednak učinak ima i NAD+. Rast stanica HeLa inhibiran je značajnije 3., 4. i 5. dana nakon dodatka NADH ili mg/mL za 60-80%. Značajniji antiproliferativni učinak NADH na stanice Hep-2 pokazuje se tek četvrti dan ; najviša koncentracija NADH inhibira rast stanica za 105%. Koncentracija NAD+ (850 mg/mL) smanjuje rast za 120% već drugi dan. Ostale koncentracije imaju znatno slabiji učinak koji do kraja pokusa ostaje nepromijenjen. Inhibitorni učinak NADH (700 mg/mL, 850 mg/mL) na rast stanica MCF-7, iznosi 3. dana 50-65%. Daljnju inhibiciju rasta uzrokuje samo najveća koncentracija NADH. Petog dana iznosi 95%. NAD+ pokazuje najveći inhibitorni učinak (za 105%) treći dan i to u najvišoj koncentraciji (850 mg/mL). Rast fibroblasta (WI 38) tretiranih s NADH i NAD+ smanjuje se drugog dana za 50%. Ostale dane razina proliferacije raste i pada i konačno dosiže početne vrijednosti. NADH i NAD+ uzrokuju postupnu stimulaciju rasta CaCo-2 stanica. Inhibitorni učinak na stanice HBL pokazuju samo više koncentracije NADH (550 mg/mL, 700 mg/mL, 850 mg/mL). Smanjuju rast za 110%. NAD+ nema inhibitorni učinak. Prikazani rezultati ukazuju na ulogu NAD+/NADH u procesu inhibicije rasta tumora. Razjašnjenje mehanizma njihovog djelovanja bit će predmet daljnjih istraživanja.

NADH; NAD+; tumor; proliferacija

nije evidentirano